PKMζ在肠易激综合征模型大鼠慢性内脏痛脊髓中枢敏化中的作用

发布时间：2017-05-25 17:29

  本文关键词：PKMζ在肠易激综合征模型大鼠慢性内脏痛脊髓中枢敏化中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究蛋白激酶M ζ（Protein kinase M ζ, PKMζ）在肠易激综合征（Irritable Bowel Syndrome, IBS）模型大鼠慢性内脏痛脊髓中枢敏化中的作用，阐明IBS慢性内脏痛的发病机制，为IBS慢性内脏痛治疗药物的开发提供新的作用靶点与思路。 方法①新生雄性SD大鼠出生后第3～21天，每天固定时间母婴分离3小时，建立IBS慢性内脏痛研究模型。②大鼠8周后测量结直肠扩张引起的腹外斜肌放电幅值，评估建模是否成功。③采用Western blot方法检测IBS慢性内脏痛大鼠脊髓胸腰段和腰骶段PKMζ以及磷酸化PKMζ的表达水平。④观察比较鞘内注射不同剂量PKMζ特异性抑制剂ZIP（1μg、5μg和10μg）前后在不同结直肠扩张压力（20～80mmHg）下腹外斜肌放电幅值的差异，明确PKMζ对IBS大鼠内脏痛觉敏感性的影响。⑤采用旷场试验方法检测鞘内注射10μg ZIP对IBS慢性内脏痛大鼠和正常对照大鼠运动功能是否有影响。 结果 1. IBS慢性内脏痛模型大鼠内脏痛觉敏感性显著增强 在结直肠扩张压下正常大鼠的腹外斜肌放电幅值（基础幅值%）分别是12.35±2.77，203.17±26.68，321.45±21.77和393.84±28.47；IBS慢性内脏痛大鼠的腹外斜肌放电幅值（基础幅值%）分别是115.25±33.72，528.15±67.13，815.10±60.29和900.41±94.41。IBS慢性内脏痛大鼠在不同结直肠扩张压力力下的腹外斜肌放电幅值均显著高于正常大鼠（p 0.05）。与正常大鼠相比，IBS慢性内脏痛模型大鼠5min内的运动总路程和平均速度显著减少（p 0.05）。 2.磷酸化PKMζ在IBS慢性内脏痛大鼠脊髓胸腰段的表达显著增强 Western blot方法检测显示，与正常对照大鼠相比，PKMζ在IBS慢性内脏痛大鼠脊髓胸腰段的表达水平无明显变化，而磷酸化PKMζ在IBS慢性内脏痛大鼠脊髓胸腰段的表达显著增高（p 0.05）。 3.磷酸化PKMζ在IBS慢性内脏痛大鼠脊髓腰骶段的表达显著增强 通过Western blot方法显示，与正常对照大鼠相比，PKMζ在IBS慢性内脏痛大鼠脊髓腰骶段的表达无明显变化。磷酸化PKMζ在IBS慢性内脏痛大鼠脊髓腰骶段的表达显著高于正常对照大鼠（p 0.05）。 4. PKMζ抑制剂ZIP可显著降低IBS慢性内脏痛大鼠内脏痛觉敏感性 ①正常对照大鼠鞘内注射不同剂量PKMζ抑制剂ZIP或溶媒前后在不同结直肠扩张压力（20～80mmHg）下腹外斜肌放电幅值差异均无统计学意义；②IBS慢性内脏痛模型大鼠鞘内注射1μg ZIP或溶媒前后在不同结直肠扩张压力（20～80mmHg）下腹外斜肌放电幅值差异均无统计学意义；③IBS模型大鼠鞘内分别注射5μg和10μg ZIP前后，，在不同结直肠扩张压力（20～80mmHg）下腹外斜肌放电幅值差异均有统计学意义（p 0.05）；④鞘内注射10μg ZIP对IBS大鼠内脏痛觉敏感性的抑制作用最少可持续至给药后150min，且最佳作用时间约为给药后30～90min。 5.鞘内注射ZIP对IBS慢性内脏痛大鼠的运动行为无明显影响 正常对照大鼠鞘内注射10μg ZIP与鞘内注射溶媒相比，5min内的运动总路程和平均速度均无明显统计学意义（p0.05）；IBS慢性内脏痛模型大鼠鞘内注射10μg ZIP与鞘内注射溶媒相比，5min内的运动总路程和平均速度也无明显差别（p0.05）。 结论PKMζ可能通过磷酸化活化后参与了IBS慢性内脏痛大鼠脊髓中枢敏化的形成，有望成为IBS慢性内脏痛药物治疗的新靶点。
【关键词】：蛋白激酶Mζ 肠易激综合征 慢性内脏痛 脊髓 中枢敏化
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R574.4;R-332
【目录】：

• 中英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-19
• 结果19-33
• 讨论33-38
• 结论38-39
• 参考文献39-43
• 致谢43-44
• 综述44-54
• 参考文献52-54

【参考文献】

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1 严博;邓莉;陈建明;;肠易激综合征相关动物模型研究进展[J];药学与临床研究;2013年05期

  本文关键词：PKMζ在肠易激综合征模型大鼠慢性内脏痛脊髓中枢敏化中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：394498