抗CD52单克隆抗体ADCC转基因测活方法的建立

发布时间：2024-04-18 21:11

　　目的建立转基因细胞法测定抗CD52单克隆抗体(单抗)的抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC)生物学活性检测方法。方法①以Ramos细胞系作为靶细胞,以Jurkat-hFcγRⅢa/FcεRIγ-NFAT转基因细胞系作为效应细胞,通过荧光素酶检测系统(Bright-Glo^TM luciferase Assay System)建立抗CD52单抗的ADCC生物学活性检测方法;②对靶细胞、量效范围、效靶比及诱导时间进行优化并进行方法学验证;③研究建立的方法应用于对不同抗CD52单抗的ADCC生物学活性检测。结果建立抗CD52单抗的ADCC生物学活性检测方法,抗CD52单抗在该方法中存在量效关系,符合四参数方程:y=(A-D)/[1+(x/C)^B]+D;经优化后确定抗体量效范围为起始质量浓度360μg/mL,4倍系列稀释9个稀释度;效靶比为3∶1,诱导时间为6.0 h;该方法具有良好的专属性;4个不同稀释组回收率样品经3次测定,相对效价分别为(45.58±...

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【部分图文】：

图1抗CD52单抗的ADCC剂量效应曲线Fig．1Dose-responsecurveofADCCpotencyofanti-CD52mAb

图1抗CD52单抗的ADCC剂量效应曲线Fig．1Dose-responsecurveofADCCpotencyofanti-CD52mAb图2ADCC中不同靶细胞对比Fig．2ComparisonofdifferenttargetcellsinADCCassay2．2．2抗体量....

图2ADCC中不同靶细胞对比Fig．2ComparisonofdifferenttargetcellsinADCCassay

图1抗CD52单抗的ADCC剂量效应曲线Fig．1Dose-responsecurveofADCCpotencyofanti-CD52mAb图2ADCC中不同靶细胞对比Fig．2ComparisonofdifferenttargetcellsinADCCassay2．2．2抗体量....

图3ADCC中单抗量效范围的优化Fig．3Optimizationofdose-responsecurveofanti-CD52

图1抗CD52单抗的ADCC剂量效应曲线Fig．1Dose-responsecurveofADCCpotencyofanti-CD52mAb图2ADCC中不同靶细胞对比Fig．2ComparisonofdifferenttargetcellsinADCCassay2．2．2抗体量....

图4ADCC中不同效靶比对比Fig．4Comparisonofdifferentratioofeffectortotarget

图1抗CD52单抗的ADCC剂量效应曲线Fig．1Dose-responsecurveofADCCpotencyofanti-CD52mAb图2ADCC中不同靶细胞对比Fig．2ComparisonofdifferenttargetcellsinADCCassay2．2．2抗体量....

本文编号：3957748