日本血吸虫蛋白磷酸酶PP2C-1的原核表达及活性分析

发布时间：2017-05-26 15:02

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【摘要】：目的构建日本血吸虫PP2C-1蛋白磷酸酶表达载体,并进行体外表达和酶活性分析。方法从日本血吸虫基因组数据库中找到一个可能编码PP2C-1蛋白磷酸酶的基因Sj-PP2C-1,设计引物并通过PCR技术扩增得到该基因,将其成熟编码区与pET28a表达载体连接后转化大肠埃希菌并用IPTG诱导表达,对表达产物的磷酸酶活性进行分析。结果成功构建了Sj-PP2C-1蛋白磷酸酶表达载体,其编码区能够在大肠埃希菌中表达分子质量单位为40ku的目的蛋白;采用V2460系统进行检测,Sj-PP2C-1具有PP2C磷酸酶活性。结论 Sj-PP2C-1基因原核表达产物具有蛋白磷酸酶活性,为研究PP2C类蛋白磷酸酶的功能打下了基础。
【作者单位】： 南通大学医学院病原生物学系;
【关键词】： 血吸虫 日本 PPC蛋白磷酸酶 克隆 表达 活性分析
【基金】：国家自然科学基金项目(No.31100112) 江苏高校优势学科建设工程资助项目(No.PAPD) 南通大学大学生创新训练计划项目(No.201410304049Z)
【分类号】：R383.24
【正文快照】： ***在真核生物中,蛋白质的可逆磷酸化是真核细胞的关键调控机制,蛋白激酶和蛋白磷酸酶分别负责调控其底物的磷酸化状态,从而实现胞内信号途径的转导[1]。蛋白磷酸酶广泛存在于微生物、植物和哺乳动物之中,涉及到细胞生长、增殖、分化、凋亡、形态建成、细胞周期和分解代谢等许

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本文编号：397169