生长抑素抗独特型卵黄抗体的制备与鉴定

发布时间：2024-05-14 21:59

　　目的在成功制备中和性生长抑素(SS)单克隆抗体的基础上,制备了SS抗独特型卵黄抗体Ab2,鉴定其生物学特性,探讨其在促进动物生长方面的应用。方法用对SS具有免疫中和性的单克隆抗体2E7免疫产蛋鸡,筛选并收集有高效价抗独特型卵黄抗体的鸡蛋,分离蛋黄,破碎蛋黄组织,用稀释和酸化沉淀法除脂蛋白,用冷酒精沉淀法纯化抗独特型卵黄抗体Ab2。用间接ELISA检测卵黄Ab2的特异性、效价和浓度,用竞争抑制和动物免疫检测卵黄Ab2β,用动物实验检测卵黄Ab2β促进鸡生长的效力。结果该SS抗独特型卵黄抗体Ab2效价为10^-5,含量为8 mg/mL。且与兔抗SS抗体发生免疫反应,不与兔抗生长激素抗体、兔抗胰岛素抗体、兔抗胃泌素抗体发生免疫反应。该SS卵黄Ab2能和异种动物兔产生的SS抗体发生免疫反应,该免疫反应能被SS竞争抑制,该SS卵黄Ab2能诱导小鼠产生SS Ab3,该SS Ab3能和SS发生免疫反应,说明它是SS卵黄Ab2β。用其作疫苗,以0.8μg/只和3.2μg/只分别皮下注射免疫小鼠,以0.8μg/羽和3.2μg/羽分别肌肉注射免疫鸡,以3.2μg/尾浸泡免疫多宝鱼。一个...

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【部分图文】：

图2SS抗独特型卵黄抗体特异性ELISA检测结果A:包被兔抗SS抗体;B:包被兔抗GH抗体;C:包被兔抗胰岛素抗体;D:包被兔抗胃泌素抗体．

Ab2;6:稀释105倍的Ab2;7:稀释107倍的Ab2;8:稀释108倍的Ab2;9:稀释109倍的Ab2;C:对照组，加PBS．图1SS抗独特型卵黄抗体效价ELISA检测结果2．2抗独特型卵黄抗体Ab2特异性好本研究制备的SS抗独特型卵黄抗体只与兔抗SS抗体发生免疫反应，不....

图3鸡IgY标准曲线

2．3抗独特型卵黄抗体Ab2浓度根据测定的标准品A值(表1)，用CurveExpert分析软件绘制标准曲线(图3);根据标准曲线，计算得本研究制备的SS抗独特型卵黄抗体的含量为8mg/mL。表1SS抗独特型卵黄抗体含量测定(A值)稀释倍数标准品Ab2(IgY)21．37952．7....

图4SS影响SS抗独特型卵黄抗体Ab2和SSmAb的结合bP＜0．01vs对照组．

图5SS抗独特型卵黄抗体Ab2影响SSmAb与SS的结合bP＜0．01vs对照组．

Ab(1∶1000)与SS(10μg/mL)的结合抑制率为66%(图5)。2．5抗独特型卵黄抗体Ab2诱导小鼠产生SS抗体实验结果显示，SS抗独特型卵黄抗体Ab2免疫小鼠后，其血清(1∶500)能和SS产生强阳性免疫反应，A值为1．230±0．101，对照组A值为0．101±0．....

本文编号：3973470