支原体污染经p38 MAPK途径降低人类细胞株28S和18S RNC-rRNA
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【摘要】:目的:研究支原体感染对人类细胞株的核糖体新生肽链复合体(RNC)中rRNA组成的影响及其相关机制。方法:分别提取支原体阳性与阴性RNC-RNA进行琼脂糖凝胶电泳,分析RNC-rRNA组成改变情况;在支原体污染环境中培养人正常肺上皮(HBE)细胞,比较培养前后RNC-rRNA的变化;对RNC-RNA条带异常细胞进行抗支原体治疗,比较治疗前后RNC-rRNA的变化。利用免疫印迹分析支原体污染对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)途径的影响。结果:不同组织来源的多株细胞中,支原体阴性和阳性细胞RNCRNA的琼脂糖电泳显示细胞中RNC-rRNA组成发生异常改变,主要体现为28S和18S真核rRNA的降低,以及16S和未知原核rRNA的增加。在污染环境中培养HBE细胞,其RNC-rRNA组成可由支原体阴性转变为阳性谱型。以环丙沙星抗支原体治疗可逆转上述RNC-rRNA谱型的改变。总蛋白和磷酸化蛋白的免疫印记结果表明,支原体污染显著抑制A549细胞的p38 MAPK途径的活化,而对该细胞的ERK1/2途径无显著改变。结论:支原体感染可通过抑制p38 MAPK活化严重改变人类细胞株中RNC-rRNA的组成,从而影响宿主细胞的翻译行为。
【作者单位】: 功能蛋白质研究广东普通高校重点实验室 暨南大学生命与健康工程研究院;暨南大学第一附属医院;
【关键词】: RNC-rRNA 支原体 人细胞系
【基金】:国家自然科学基金资助项目(No.81372135) 广东省自然科学基金资助项目(No.2014A030313369)
【分类号】:R375
【正文快照】: 细胞体外培养模型是病理生理研究中不可或缺的工具,然而,实验室支原体污染在世界范围内广泛流行,其在体外组织培养的污染率高达5%~35%[1-2]。支原体是已知最小的原核生物,直径多为0.1~0.3μm,能够通过除菌滤膜(0.22μm),其唯一可见的细胞器是核糖体。受非致病性支原体污染的细
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