鼠疫耶尔森菌Pla毒力蛋白的表达、纯化及其活性研究

发布时间：2017-06-01 13:16

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【摘要】：目的制备鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)重组纤溶酶原激活剂(Pla)蛋白,为研究鼠疫菌蛋白之间相互作用和鼠疫的免疫学诊断奠定基础。方法应用PCR从鼠疫菌基因组中扩增pla基因,将其克隆到p ET28a表达载体中;转化大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达;SDS-PAGE电泳检测表达结果;应用8 mol/L尿素将包涵体变性,梯度稀释透析法将其复性,SDS-PAGE电泳和Western印迹检测目的蛋白;奶粉平板法检测纤溶酶原激活剂活性。结果与结论琼脂糖凝胶电泳和测序结果证明表达质粒构建成功;SDS-PAGE电泳结果表明Pla蛋白以包涵体形式表达,表达产物主要为目的蛋白,且目的蛋白的表达量较高;包涵体经变性、复性得到了电泳纯Pla蛋白,并具有纤溶酶原激活剂活性。该研究提供了一种简单、快速、高效制备具有活性的Pla蛋白的方法。
【作者单位】： 安徽医科大学;军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室;
【关键词】： 鼠疫耶尔森菌 纤维蛋白酶原激活剂 表达 纯化
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31430006,81171529) 国家重点基础研究发展计划资助项目(2014CB744405)
【分类号】：R378
【正文快照】： 鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis,简称鼠疫菌)是引起鼠疫的病原体。近年来,世界鼠疫疫情呈上升趋势,2000年世界卫生组织将鼠疫列为重新抬头的传染病[1]。同时,鼠疫菌又是一种标准的生物战剂和生物恐怖剂,是未来生物战或生物恐怖最有可能使用的生物战剂之一。鼠疫菌是在6000~10 0

【参考文献】

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【共引文献】

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【相似文献】

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