提高新生大鼠原代心肌细胞纯度方法的探讨

发布时间：2017-06-02 10:21

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【摘要】：目的:探讨提高新生大鼠原代心肌细胞纯度的方法。方法:应用0.08%心肌细胞消化液重复消化出生第1-3天乳鼠的心肌组织多次;收集的细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养基中和。用差速贴壁分离法分离后,加入红细胞裂解液,以除去红细胞,加入溴脱氧尿嘧啶(Brdu)纯化心肌细胞后置CO2培养箱孵育2天,无血清同步化1天。结果:分离1只乳鼠获得的心肌细胞产量约为1.2×106个,有活力心肌细胞占90%以上,心肌细胞纯度90%,3-4天后心肌细胞融合成片,并出现自发性节律性搏动。结论:该方法在保证心肌细胞产量和心肌细胞活性的同时,能大幅度提高心肌细胞纯度。
【作者单位】： 河南中医学院;河南中医学院第一附属医院;
【关键词】： 新生大鼠 心肌细胞 原代培养 鉴定
【基金】：国家自然科学基金委面上项目(81173410):参加优化方通过TGF-β/smads通路改善心梗后心室重构作用机制的研究,负责人:朱明军;国家自然科学基金委面上项目(81373853):参附益心颗粒通过抑制AngⅡ改善心梗后心衰大鼠心肌代谢重构的机制研究,负责人:朱明军 河南省高校科技创新团队支持计划(13IRTSTHN012),负责人:朱明军
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 自1960年Haracy L等[1]首次对乳鼠的心肌细胞进行培养以来,原代心肌细胞越来越多的用于实验中,经过国内、外学者对原代心肌细胞培养方法的不断探索,原代心肌细胞的产量和活性都得到了大幅度的提高。然而,随着实验的不断深入,对原代心肌细胞的纯度要求也越来越高,尤其在探讨药

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