生物素标记的布鲁菌多克隆抗体的制备

发布时间：2017-06-05 10:39

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【摘要】：目的制备生物素标记的兔抗牛种布鲁菌544A多克隆抗体,并进行鉴定。方法复苏并扩大培养牛种布鲁菌544A,灭活后制备灭活疫苗,经背部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,5次免疫后,经心脏采血,分离血清,采用硫酸铵盐析法对血清中的多克隆抗体进行粗提,再通过蛋白亲和柱层析法对抗体进一步纯化,利用SDS-PAGE分析抗体的纯度,间接ELISA法检测抗体的效价和特异性,Bradford法检测抗体的蛋白含量,并利用生物素对抗体进行标记。结果制备的牛种布鲁菌544A的兔多克隆抗体纯度较高,效价为1:256 000,特异性较好,蛋白含量为2.83 mg/ml,每摩尔蛋白中标记的生物素摩尔数为3.09。结论成功制备了生物素标记的牛种布鲁菌多克隆抗体,为下一步研制牛种布鲁菌免疫检测试剂盒奠定了物质基础。
【作者单位】： 吉林大学公共卫生学院卫生检验教研室;吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心;
【关键词】： 布鲁菌 多克隆抗体 免疫检测
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81072337,81473018);国家自然科学基金青年基金项目(81401721) 吉林大学“大学生创新创业训练计划”项目(2014A72317)
【分类号】：R392
【正文快照】： 布鲁菌病(Brucellosis)是由布鲁菌(Brucella)引起的一种人畜共患传染病,流行范围广,几乎遍布世界各地,每年约有50万的新增病例[1-2]。该病被世界卫生组织(World Health Organization,WHO)、世界动物卫生组织(Office international desépizooties,OIE)、联合国粮食及农业组织(

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本文编号：423540