人成纤维细胞胶原吞噬与非胶原吞噬亚群分离及差异基因的筛选

发布时间：2017-06-13 22:02

  本文关键词：人成纤维细胞胶原吞噬与非胶原吞噬亚群分离及差异基因的筛选，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨建立新的分离人成纤维细胞胶原吞噬亚群(CPSF)和成纤维细胞非胶原吞噬亚群(n CPSF)的方法,并筛选两者差异表达基因。方法:根据CPSF和n CPSF吞噬功能的差异,联合应用胶原包被的异硫氰酸荧光乳胶微球(COL-FITC-LB)吞噬技术和流式细胞分离技术分离二者,并通过生物芯片技术和real-time PCR筛选、验证两者差异表达基因,寻找CPSF和n CPSF具有特征性的分子标志物。结果:成功分离CPSF和n CPSF,并对其基因差异性分析,得到17个差异表达基因。与n CPSF比较,CPSF中有12个基因表达上调,5个表达下调。对其中与胶原吞噬功能可能相关的3个基因进行验证,即纤溶酶原激活物受体相关蛋白(urokinase plasminogen activator receptor-associated protein,u PARAP)、细胞色素b-245,β多肽(cytochrome b-245,beta polypeptide,CYBB)和同源物1(Hook homolog 1,HOOK1),CPSF中u PARAP表达量为n CPSF的2 788倍;CPSF中CYBB表达量为n CPSF的0.85倍;CPSF中HOOK1表达量为n CPSF的1.96倍,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:建立了分离CPSF和n CPSF的新方法。CPSF和n CPSF最主要的差异表达基因是u PARA P,对成纤维细胞胶原吞噬功能具有重要影响,是治疗胶原代谢疾病新的候选靶分子之一。
【作者单位】： 中南大学湘雅医院口腔医学中心;首都医科大学附属口腔医院牙体牙髓科;
【关键词】： 成纤维细胞 异硫氰酸荧光乳胶微球 基因芯片技术 尿激酶型纤溶酶原激活剂受体相关蛋白
【基金】：湖南省自然科学基金(2015JJ4074)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： Methods:The CPSF and n CPSF was isolated by using collagen-fluorescein-isothiocynate-latex第一作者(First author):李江,Email:978707328@qq.combead(COL-FITC-LB)phagocytosis technique and FCM sorting method.Microarray analysis wasused to screen the different

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