HIF-1α及VEGF在大鼠脑室出血模型中的表达及意义

发布时间：2017-06-14 22:10

  本文关键词：HIF-1α及VEGF在大鼠脑室出血模型中的表达及意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：原发性脑室出血是指出血位于脑室脉络丛或室管膜下区1.5cm以内，局限于脑室系统的出血。它是一种临床较为少见但极其严重的急症，具有高致残率与高死亡率的特点。本实验通过侧脑室注血法建立大鼠脑室出血模型，应用Western bloting技术检测脑室出血后不同时间点室管膜下区HIF-1α及VEGF蛋白的表达变化，并探讨HIF-1α和VEGF在脑室出血后脑组织损伤过程中可能发挥的作用机制。 方法：1.健康成年SD雄性大鼠60只，，体重300g±10g。采用随机数字法分为手术组(n=50)与假手术组(n=10)，每组10只。2.参照K.R.Lodhia的报道的方法建立大鼠侧脑室出血模型，并进行一定程度改进。侧脑室注血组是将160ul非抗凝自体鼠尾动脉血分2次注入到右侧脑室，建立脑室出血模型，按提取标本的时间不同分为术后1、2、5、7、14天五个时间点。假手术组动物仅切开头皮，于定位点钻孔穿刺并注射160μl双蒸水。各组大鼠于同一环境单独喂养。3.手术组动物按照规定时间点行神经行为学评分后处死，假手术组于术后2小时处死。动物于生物冰块上断头取脑，沿穿刺点冠状切开脑组织，观察侧脑室宽度及形态变化后，取室管膜下区脑组织置于液氮骤冷2小时后，于-80度冰箱保存。采用western bloting技术检测脑室出血后HIF-1α和VEGF的时序性表达规律与出血时间的相关关系。4.统计学分析：使用SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计学分析。组间计量资料比较采用t检验，以P0.05表示差异有统计学意义。 结果：1.一般情况观察：脑室注血组大鼠麻醉清醒后均出现不同程度精神萎靡，活动少，饮水及摄食量明显减少，体重随时间逐渐下降。不同时间点大鼠神经功能缺损评分：术后1、2、5、7、14天分别为10.8±1.1,13.6±0.9,15.7±1.2，16.4±1.2，17.9±1.1.假手术组大鼠神经行为学评分无异常（19分），经统计学检验，脑室注血组1、2天与假手术组比较有统计学意义（P＜0.05）。2.免疫印记Western Bloting结果：（1）HIF-1α蛋白：在脑室注血组第1天即可见明显条带出现，第2天时条带增宽，达到高峰，第5天后开始减少，到第14天条带几乎不可见，与假手术组相当。除第14天组外，其余各实验组与对照组比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。各实验组间比较，除第1天与第5天之间无统计学意义（P＞0.05）外，其余各组之间差异均有统计学意义（P＜0.05）；（2）VEGF蛋白：在实验组第1天可见条带出现，第2天明显有增宽，达到高峰，到第五天后开始减少，第14天条带已基本不可见。除第14天外,其余各实验组与假手术组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05），各实验组间比较，除第1天与第5天之间无统计学意义（P＞0.05）外，其余各组之间差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论：1.本实验采用大鼠自体动脉血注入侧脑室的方法建立大鼠脑室出血的模型，动物死亡率低，模型较稳定，使用非抗凝的动脉血更符合脑室出血的发病过程，能够较好的模拟临床上脑室出血后的各种病理生理变化。2.脑室出血后HIF-1α在室管膜下区的表达具有时间相关性，第1天即有明显表达，第2天达到高峰，第5天有所下降，到第14天与对照假手术组已无明显差别。3.VEGF的表达也具有时序性，在脑室注血后第1天已有表达，第2天明显增加，到第5天开始下降，第14天与对照假手术组已无明显差别。4.脑室出血后脑室内血肿对脑室壁的机械压迫作用及脑脊液循环吸收障碍导致脑室扩张，颅内压升高，脑血流灌注不足，引起脑组织缺血缺氧。HIF-1α与VEGF在脑室出血后室管膜下区的表达明显且具有时间相关性，而二者的表达亦具有相关性，在脑室出血后脑缺血缺氧的一系列病理生理变化中起了重要作用。
【关键词】：自发性脑室出血 HIF-1α VEGF 室管膜下区 蛋白免疫印记
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R743.34
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9-10
• 材料与方法10-18
• 结果18-20
• 附图20-24
• 附表24-25
• 讨论25-29
• 结论29-30
• 参考文献30-34
• 综述 原发性脑室出血研究进展34-43
• 参考文献39-43
• 致谢43-44
• 个人简历44

【参考文献】

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本文编号：450673