H9C2细胞培养液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究
发布时间:2017-09-06 00:21
本文关键词:H9C2细胞培养液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究
【摘要】:目的:探讨H9C2细胞培养液对骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)分化为心肌样细胞的诱导作用。 方法:运用全骨髓贴壁筛选法分离培养大鼠MSCs,制备H9C2细胞培养液作为诱导培养液,将MSCs诱导培养1、3、5、7天。以表达心肌特异性标志物的H9C2细胞为阳性对照组,以H9C2细胞培养液诱导得MSCs为分化实验组,以未处理的MSCs为阴性对照组;对各组细胞及MSCs增殖分化细胞进行心肌细胞特性检测,即用免疫荧光法和western-blot检测其肌钙蛋白T(cTnT)、心肌细胞结蛋白(desmin)的表达,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测其心肌细胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重链(a-MHC)和β-心肌肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA的表达。 结果:1H9C2细胞培养液诱导MSCs培养7天,免疫荧光技术检测各组细胞中肌钙蛋白T的表达,MSCs增殖分化细胞中cTnT阳性细胞达0.179±0.011,显著高于对照组(P<0.05)。 2H9C2细胞培养液诱导MSCs培养7天,western-blot检测各组细胞中肌钙蛋白T、desmin的表达,western-blot检测诱导培养MSCs后分化细胞cTnT蛋白表达明显上调(P<0.05),desmin表达明显上调(P<0.05)。 3H9C2细胞培养液诱导MSCs培养7天,RT-PCR检测各组细胞中a-MHC与β-MHC mRNA表达,RT-PCR检测分化细胞a-MHC与β-MHC mRNA表达均上调(P<0.05)。 结论:H9C2细胞培养液能诱导MSCs向心肌样细胞分化。
【关键词】:骨髓间充质干细胞 H9C2 心肌样细胞
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R329.2
【目录】:
- 英汉缩略语名词对照5-6
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 前言10
- 1 材料和方法10-17
- 2 结果17-19
- 3 讨论19-21
- 全文小结21-22
- 参考文献22-24
- 文献综述:骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化及其机制24-30
- 参考文献27-30
- 致谢30-31
- 硕士期间发表的论文31-32
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
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,本文编号:801071
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