OPN诱导小鼠MSCs向表皮细胞分化促进创面愈合的研究

发布时间：2017-09-19 05:31

  本文关键词：OPN诱导小鼠MSCs向表皮细胞分化促进创面愈合的研究

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【摘要】：目的以骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因敲除小鼠及野生型小鼠为研究对象,探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分化为表皮细胞的潜能及骨桥蛋白在分化过程中的作用。方法体外实验:将分离培养的野生型(WT)和基因敲除型(KO)新生鼠(鼠龄1 d)MSCs鉴定纯度后分别设为WT组和KO组,取其第3代分别在表皮转化培养体系中孵育,通过镜下观察、流式细胞术、免疫荧光染色、Western blot等方法,比较两组表皮细胞标志物(CK14)表达水平的差异。动物实验:实验分4组,WT组小鼠创周注射GFP-MSCs(WT/MSCs)组,WT小鼠创周注射PBS(WT/PBS)组,KO小鼠创周注射GFP-MSCs(KO/MSCs)组,KO小鼠创周注射PBS(KO/PBS)组,每组各8只雄鼠,鼠龄6~8周,体质量20~25 g,按分组将分离培养的GFP-MSCs和PBS注射到创周,观察创面愈合及GFP-MSCs向表皮细胞分化的情况。结果分离培养的MSCs呈梭形或成纤维细胞样生长,流式细胞术检测MSCs的纯度超过91%;诱导分化第12、17天的两组细胞检测发现,WT组和KO组的细胞均表达CK14;第17天免疫荧光结果示WT组CK14的表达阳性率(0.936 3±0.009 5)明显高于KO组(0.647 5±0.023 1),(P0.01);Western blot检测结果也显示KO组的CK14表达量(0.389 4±0.016 8)明显低于WT组(0.614 6±0.015 3),(P0.01)。动物实验WT/PBS组创面愈合速度快于KO/PBS组(P0.05),WT/MSCs组的创面愈合速度快于WT/PBS组(P0.05),注射的GFP-MSCs向表皮细胞分化的能力WT/MSCs组强于KO/MSCs组(P0.05)。结论 OPN在体内、体外均可诱导MSCs分化为表皮细胞,进而促进创面愈合。
【作者单位】： 第三军医大学西南医院整形美容外科;蚌埠医学院烧伤整形科;
【关键词】： 愈合 间充质干细胞(MSCs) 骨桥蛋白(OPN) 表皮 分化
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81071563,81272102) 重庆市应用开发项目(2014yykf A0158)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 徽蚌埠,蚌埠医学院烧伤整形科2)皮肤的损伤修复需要表皮细胞不断增殖迁移以维持皮肤表面完整性。而间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)具有高度自我更新能力和多向分化潜能,能向多种细胞及组织分化以修复缺损,尤其向表皮细胞的转化已被应用于创面组织的修复[1-4]。研究

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本文编号：879773