幽门螺杆菌单克隆抗体的制备及其检测应用

发布时间：2017-09-19 06:04

  本文关键词：幽门螺杆菌单克隆抗体的制备及其检测应用

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【摘要】：幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种定居于人胃部及十二指肠的微需氧革兰氏阴性菌,其长期感染导致胃炎、胃及十二指肠溃疡与胃癌。幽门螺杆菌感染主要始于儿童期,其自发性清除非常少见,及早通过检测发现并加以抗生素治疗可有效降低成人感染率。本文通过体外培养Hp标准菌株ATCC43504,将其裂解液作为抗原免疫Balb/c小鼠,通过常规技术路线制备杂交瘤细胞。经间接ELISA法筛选和多次有限稀释法亚克隆得到21株稳定分泌抗Hp抗原的杂交瘤细胞株,制备腹水并用辛酸硫酸铵联合沉淀法纯化单克隆抗体。将得到的单克隆抗体在胶体金免疫层析平台上进行配对和样品检测,获得多组灵敏度和特异性相对较高的单克隆抗体组合,其中以2-18E1作为包被抗体,2-9H5或2-17E9作为标记抗体检测细菌培养裂解物的最低限为25 ng/m L,为Hp抗原检测试剂的研发提供了基础。
【作者单位】： 华南理工大学生物科学与工程学院;华南理工大学轻工与食品学院;
【关键词】： 幽门螺杆菌 抗原 单克隆抗体 胶体金免疫层析
【基金】：卫生部重大新药创制(2011ZX09506-001) 广东省战略性新兴产业核心技术攻关项目(2012A080800007) 中国博士后科学基金(2012M521593;2013T60796)
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的革兰氏阴性细菌。Hp的持续感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤以及胃癌的主要致病因素,世界卫生组织(WHO)已将其列为I级致癌物质[1]。全世界约有半数以上的人口感染Hp

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