不同时程胰岛素治疗对糖尿病因素阻碍舒芬太尼后处理心肌保护作用的影响
本文关键词： 胰岛素 缺血再灌注损伤 舒芬太尼 糖尿病 出处：《安徽医科大学》2015年硕士论文 论文类型：学位论文
【摘要】：目的舒芬太尼后处理能够减轻非糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤,而糖尿病因素可通过影响GSK-3β蛋白磷酸化的表达削弱舒芬太尼后处理的心肌保护作用。研究表明,短时程胰岛素治疗不能恢复七氟烷后处理对糖尿病大鼠的心肌保护作用,但不同时程胰岛素治疗对糖尿病因素阻碍舒芬太尼后处理心肌保护作用的影响尚不明确,本研究旨在研究不同时程胰岛素治疗对糖尿病因素阻碍舒芬太尼后处理心肌保护作用的影响,并探讨GSK-3β在其中的作用。方法雄性SD大鼠,体重250~280g。采用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备1型糖尿病模型。大鼠心肌缺血再灌注损伤模型建立的方法为阻断冠状动脉左前降支(left anterior descending,LAD)30min,再开放120min。取非糖尿病健康大鼠24只,随机分为3组:非糖尿病假手术组(NDM-sham,n=8)、非糖尿病缺血再灌注组(NDM-IR,n=8)、非糖尿病舒芬太尼后处理组(NDM-SP,n=8)。另取造模成功的糖尿病大鼠56只,随机分为7组:糖尿病假手术组(DM-sham,n=8)、糖尿病缺血再灌注组(DM-IR,n=8)、糖尿病胰岛素短时程治疗+缺血再灌注组(DM-IR-Ins-S,n=8)、糖尿病胰岛素长时程治疗+缺血再灌注组(DM-IR-Ins-L,n=8)、糖尿病舒芬太尼后处理组(DM-SP,n=8)、糖尿病胰岛素短时程抗治疗+舒芬太尼后处理组(DM-SP-Ins-S,n=8)和糖尿病胰岛素长时程抗治疗+舒芬太尼后处理组(DM-SP-Ins-L,n=8)。缺血再灌注组(-IR组)于再灌注前5 min静脉注射1 ml生理盐水,舒芬太尼后处理组(-SP)于再灌注前5 min予舒芬太尼1μg/kg静脉注射,胰岛素短时程治疗组(-Ins-S组)于术前两天每日予胰岛素6-8u皮下注射,胰岛素长时程治疗组(-Ins-L组)于术前两周每日予胰岛素6-8u皮下注射。除sham组外,其余各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支30 min、再灌注120 min,建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。分别于缺血前即刻(T0)、缺血30min(T1)和再灌注120min(T2)时记录HR、MAP,计算RPP。于再灌注120 min时取动脉血1ml,测定血浆c Tn I浓度。取血后处死大鼠,取心脏,染色后测定缺血危险区(AAR)和梗死区(IS)体积,计算IS/AAR。另按照上述分组每组各取大鼠4只,(n=4),于再灌注5min后取左室心肌组织,western blotting法检测p-GSK-3β、GSK-3β蛋白表达水平。结果大鼠一般状况:给予STZ后1周,糖尿病组大鼠体重较非糖尿病组下降,血糖值较非糖尿病组升高(P0.05)。短时程和长时程胰岛素治疗均能降低糖尿病大鼠血糖水平。与非糖尿病组大鼠比较,长时程胰岛素治疗各组血糖差异无统计学意义,而短时程胰岛素治疗组大鼠血糖值仍较高。血流动力学:各组大鼠心率、平均动脉压及心率血压乘积在T0时差异无统计学意义(P0.05).。除sham组外,其余各组大鼠在T1和T2时刻的HR、MAP及RPP值较T0时刻均降低(P0.05)。在T2时刻,与sham组相比,余各组大鼠的HR、MAP和RPP均降低(P0.05)。余各组组内或组间比较差异无统计学意义(P0.05)。心肌梗死面积:与NDM-IR组相比,NDM-SP组的IS、IS/AAR下降(P0.05);与NDM-SP组相比,DM-SP组的IS/AAR升高(P0.05);与DM-SP组比较,DM-SP-Ins-L组IS减少(P0.05),而DM-SP-Ins-S组IS降低无明显统计学意义(P0.05);与DM-IR组相比,DM-IR-Ins-L组和DM-IR-Ins-S组均未能降低IS(P0.05)。c Tn I:与各自sham组相比,NDM-IR组和DM-IR组,血浆c Tn I水平升高(P㩳0.05);与NDM-IR组相比,NDM-SP组血浆c Tn I水平降低(P0.05);与NDM-SP组相比,DM-SP组血浆c Tn I水平升高(P0.05);与DM-SP组比较,DM-SP-Ins-L组c Tn I减少(P0.05),而DM-SP-Ins-S组c Tn I减少无明显统计学意义(P0.05)。心肌组织总GSK-3β、p-GSK-3β蛋白活性水平:各组GSK-3β总蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P0.05)。与NDM-IR组比较,NDM-SP组的大鼠心肌组织p-GSK-3β表达增加(P0.05);与NDM-SP组比较,DM-SP组p-GSK-3β表达并未增加;与DM-SP组比较,长时程胰岛素治疗能明显增加p-GSK-3β的表达水平P0.05),短时程胰岛素治疗组的p-GSK-3β的表达水平增加无明显统计学意义(P0.05)。结论糖尿病因素削弱了舒芬太尼后处理对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤的心肌保护作用。长时程胰岛素治疗可恢复糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤模型中舒芬太尼后处理的心肌保护作用,其机制可能与恢复被抑制的GSK-3β磷酸化水平有关。
[Abstract]:Objective To study the effect of short - term insulin therapy on myocardial protection in diabetic rats . Fifty - six diabetic rats were randomly divided into 7 groups : DM - sham , n = 8 , DM - IR , n = 8 , DM - IR - Ins - S , n = 8 , DM - SP , n = 8 , DM - SP - Ins - S , n = 8 , DM - SP - Ins - L , n = 8 . The blood glucose levels of diabetic rats were measured at the time of reperfusion ( T0 ) , ischemia 30min ( T1 ) and reperfusion for 120 min ( P - Ins - S group ) . Compared with the NDM - IR group , there was no significant difference in the expression level of the DM - SP - Ins - L group and the DM - SP - Ins - L group ( P0.05 ) . Compared with the DM - SP group , there was no significant difference in the expression level of the DM - SP - Ins - L group ( P0.05 ) .
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614
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，本文编号：1492432
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