慢病毒介导的RNA干扰下调IL-6抑制脊髓顿挫损伤后Caspase-3表达

发布时间：2019-05-29 21:02

【摘要】：目的通过慢病毒介导的RNA技术干扰IL-6的表达,探究脊髓顿挫损伤后Caspase-3的表达变化。方法Allen′s打击法制备脊髓顿挫伤(SCC)模型,BBB评分确认造模成功;免疫组织化学和Q-PCR技术定位和定量测定IL-6和Caspase-3的表达变化;Gene MANIA网站预测IL-6与Caspase-3的联系;慢病毒介导的RNA干扰技术构建IL-6干扰模型后,Q-PCR技术定量测定Caspase-3的表达变化。结果 SCC后SD大鼠BBB评分显著低于假手术组(P0.05);IHC结果显示:IL-6和Caspase-3均在在脊髓白质胶质细胞表达;Q-PCR结果显示:IL-6在损伤后12h表达显著增加,3d、28d表达持续下降;Caspase-3在损伤后12h、3d、28d表达持续下降。生物信息学分析结果:IL-6和Caspase-3在大鼠体内存在共定位关系。干扰组Caspase-3表达比空载组显著降低(P0.05)。结论在SCC后,抑制IL-6表达可降低Caspase-3表达水平。
[Abstract]:Objective to investigate the changes of Caspase-3 expression after spinal cord collapse injury by lentivirus mediated RNA interference with IL-6 expression. Methods the (SCC) model of spinal cord contusion was established by Allen's percussion method, and the BBB score confirmed the success of the model, and the expression of IL-6 and Caspase-3 was located and quantitatively detected by immunohistochemistry and Q-PCR. The relationship between IL-6 and Caspase-3 was predicted by Gene MANIA website, and the expression of Caspase-3 was quantitatively detected by Q-PCR after the IL-6 interference model was constructed by lentivirus mediated RNA interference technique. Results the BBB score of SD rats after SCC was significantly lower than that of sham operation group (P 0.05); IHC). The results of); IHC showed that IL-6 and Caspase-3 were expressed in white matter glial cells of spinal cord. The results of Q-PCR showed that the expression of IL-6 increased significantly at 12 h after injury, decreased continuously on the 28th day, and decreased continuously on the 28th day after injury, and the expression of Caspase-3 continued to decrease on the 12th day and 28th day after injury. The results of bioinformatics analysis showed that there was a co-localization relationship between IL-6 and Caspase-3 in rats. The expression of Caspase-3 in interference group was significantly lower than that in no-load group (P 0.05). Conclusion inhibition of IL-6 expression can decrease the expression of Caspase-3 after SCC.
【作者单位】： 成都医学院基础医学实验教学中心;成都医学院;
【基金】：省级大学生创新实验训练计划(201313705029)
【分类号】：R651.2

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本文编号：2488226