p75NTR敲除对小鼠股骨矿化发育的抑制作用

发布时间：2021-08-09 16:05

  目的对比野生型和p75 neurotrophin receptor(p75NTR)敲除小鼠股骨骨质的改变,探讨p75NTR敲除对小鼠股骨矿化发育的影响。方法取同窝p75NTR~(+/+)(野生型)和p75NTR~(-/-)(敲除型)雄性小鼠,出生后8周龄时行股骨Micro-CT扫描,检测股骨松质骨的骨量(BV)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨表面积/骨量(BS/BV)、骨小梁分离度(Tb.Sp)和皮质骨的骨量(Ct.BV)、骨皮质厚度(Ct.Tb Th)、骨皮质的骨表面积/骨量(Ct.BS/BV);出生后40 d分别取同窝两种基因型雄性小鼠行钙黄绿素荧光双标实验,以检测股骨的矿化沉积速率;提取4周龄大小鼠股骨总RNA及蛋白质,RT-PCR和Western blot检测ALP、Runx2的表达。结果 Micro-CT结果显示:p75NTR~(-/-)小鼠股骨的BV、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Ct.BV、Ct.Tb Th明显低于同窝p75NTR~(~(+/+))小鼠(P0.05),同时,p75NTR~(-/-)小鼠的BS/BV、Tb.Sp、Ct.BS/BV明显高于p75NTR~(+/+)小鼠(P0.01);钙黄绿素荧光双标检测结果显示:p75NTR~(-/-)小鼠股骨的矿化速率明显低于同窝p75NTR~(+/+)小鼠(P0.01);RT-PCR及Western blot结果显示:p75NTR~(~(-/-))小鼠的ALP、Runx2表达均明显低于p75NTR~(~(+/+))小鼠(P0.01)。结论 p75NTR敲除对小鼠股骨的矿化发育有一定的抑制作用。
【图文】：

TA-3'123下游5'-GGTGAAACTCTTGCCTCGTC-3'ALP上游5'-AACCCAGACACAAGCATTCC-3'146下游5'-CGAAGGGTCAGTCAGGTTGT-3'1．6股骨总蛋白的提取及Westernblot检测ALP、Ｒunx2的表达分别提取4周龄大p75NTＲ－/－、p75NTＲ+/+雄性小鼠股骨总蛋白并定量，以20μg/孔上样，采用Westernblot检测ALP、Ｒunx2蛋白表达，GAPDH作为内参。1．7统计学分析采用SPSS13．0统计软件。计量资料以xs，



本文编号：2567427