雪旺细胞和神经干细胞联合治疗大鼠脊髓损伤的行为学与组织病理学研究

发布时间：2020-01-28 01:46

【摘要】：背景：脊髓损伤（spinal cord injury, SCI）可引起损伤部位神经元死亡、局部轴突变性及脱髓鞘等严重病变，进而引起严重的神经损伤后果，是目前临床上多发且致残率较高疾病。同时，治疗SCI也是当前医学界面临的重大难题。雪旺细胞（Schwann cells）是一种主要分布在周围神经系统中神经元突起周围的功能细胞，其外表面有一层基膜，在周围神经再生中起重要作用。神经干细胞（neural stem cells, NSCs）不仅具有分化为少突胶质细胞、星形胶质细胞和神经元的能力，同时能自我更新，可提供大量脑组织细胞。这两种细胞都能在一定程度上帮助修复SCI，但其协同作用尚未进行相关研究。目的：本研究通过联合两种细胞对大鼠损伤脊髓进行治疗，从而观察其行为学与组织病理学结果，以期寻求一种有效修复SCI的方法，并评价此方法的可行性与临床指导意义。方法：应用Allen’s造模改良法制备大鼠脊髓损伤模型，待SCI大鼠模型成功建立后，采用雪旺细胞、神经干细胞、以及联合雪旺细胞和神经干细胞修复大鼠脊髓损伤，细胞输入方法采用尾静脉注射方法，输入量为1105，连续注射7d。细胞输入后1周、2周、4周和8周，用BBB评分评价大鼠运动功能的恢复情况，并用病理学染色观察大鼠脊髓损伤修复状况。结果：在本研究中，我们神经干细胞、雪旺细胞、以及联合神经干细胞和雪旺细胞对应用Allen’s成功制备的SCI大鼠进行治疗。实验结果表明联合神经干细胞和雪旺细胞组，大鼠运动功能恢复良好，特别是在注射后8周，BBB评分均大幅上升；而单独神经干细胞或雪旺细胞组，BBB评分有一定上升，但效果不如联合应用组。HE染色结果发现可见联合应用组脊髓恢复正常的灰质和白质，组织也不再变形或皱缩，形态恢复正常；而两个单独细胞组脊髓形态虽然有一定恢复，，受损范围也进一步变小，且损伤区域周围有较多白质残存，腹侧半的灰质和白质也基本正常，但依然有少量微囊腔存留。结论：我们的研究证明大鼠脊髓损伤可通过静脉注射神经干细胞和雪旺细胞，细胞归巢到损伤部位后促进对损伤脊髓的修复。研究为临床上治疗脊髓损伤病人提供参考，有较大的临床意义。
【图文】：

神经干细胞,杂细胞,干细胞,细胞碎片

结果经干细胞和雪旺细胞形态学观察经干细胞培养一周后在光学显微镜下观察，细胞呈球状集 NSCs 球呈悬浮生长，细胞增殖旺盛(图 2A)。在原代培养时看见少许细胞碎片以及部分贴壁的杂细胞，而经传代后，上甚至消失，且生长状态良好。在相差显微镜下，NSCs 呈球形小不一。同样，原代培养的雪旺细胞中也含有一些杂质，雪呈长卵圆形，其长轴与轴突平行，核周有少量胞质（图 2B）

干细胞,HE染色,大鼠,白质

显示受损范围变小，同时可观察到较多的白质残损伤区域周围，腹侧半的灰质和白质未见明显异常，但观察到微囊腔存在（图 3B）；第三组形态与第二组相似见部分恢复，但与正常对照相比仍有区别（图 3C）；第学未见任何改变，可以观察到 SCI 后受损组织仍严重变细损伤区域范围大，震中位于中央，没有观察到明显的白纵切震中切面，可观察到白质、灰质界限消失，甚至可坏死囊腔，正常结构已被完全破坏，（图 4D）。表明通过干细胞和雪旺细胞，损伤的脊髓可显著修复，两者具有协
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R651.2

【共引文献】