富血小板纤维蛋白应用于骨外露创面皮瓣转移的实验研究

发布时间：2020-04-13 17:59

【摘要】：研究目的:探讨局部应用富血小板纤维蛋白(Platelet-rich firbrin,PRF)对覆盖于骨外露创面随意皮瓣成活的影响,深入了解自身来源的PRF在皮瓣转移过程中的作用,探讨PRF是否可以加快皮瓣血管再生、提高皮瓣新生毛细血管密度,为临床中除骨外露创面以外的其他难治性创面提供治疗思路及实验依据。研究方法:清洁级新西兰兔30只,体重2.4～3.Okg,雌雄不限,由厦门大学附属东南医院动物实验中心提供并寄养,正常饮食。将30只新西兰兔编号,使用统计学方法随机分为两组,实验组和对照组,每组15只。用心脏采血法取新西兰兔全血20mL,3000r/min,离心10min制备PRF。于新西兰兔头部作4cm×2cm、蒂部位于颅骨近耳侧的骨性隆起处的皮瓣,宽与两耳连线平行,各组分别给予下述处理:①实验组:形成皮瓣后剔除皮瓣下相应位置的骨膜,在剔除骨膜后的颅骨上均匀覆盖制作好的PRF膜,用“5-0”丝线沿皮瓣三周原位间断缝合,间断留长线,缝合完毕后消毒,再将无菌纱布折叠好放置于皮瓣上方,打包包扎创面。②对照组:剔除骨膜后不行任何处理,其余同前。分别于术后3天、7天和14天在实验组与对照组各取5只新西兰兔观察皮瓣大体成活情况,计算皮瓣成活率。并切取皮瓣组织块行组织学观察、血管密度计算、免疫组化测定VEGF、CD34,分析术后3个时间点实验组与对照组皮瓣新生血管密度数量及皮瓣成活率的差异是否有统计学意义,并初步探讨其作用机制。研究结果:1.大体观察肉眼观察可见,成活的皮瓣质地柔软、色泽红润,刀割或针刺时出血;坏死的皮瓣质地较硬、颜色较黑,刀割或针刺时不出血。各时间点实验组的皮瓣坏死面积较对照组小,颜色接近正常组织,组织水肿程度普遍较轻,坏死部分位于皮瓣远端。2.皮瓣成活率检测术后第14天,实验组的皮瓣成活率为(98.02土0.74),对照组的皮瓣成活率为(86.20±1.84),P0.05,结果有统计学意义,实验组皮瓣存活率较对照组高。3.组织学观察及血管密度检测皮瓣中央组织块HE染色可见:各组皮瓣随时间的延长,炎症反应越来越轻,血管密度越来越大。实验组与对照组相比,实验组炎症反应较对照组轻,实验组血管密度较对照组大。4.免疫组化测定VEGF和CD34用VEGF抗体标记血管内皮细胞和成纤维细胞,实验组较对照组阳性率高,说明实验组皮瓣血管内皮细胞及成纤维细胞较对照组高;用CD34标记新生血管并计数,发现实验组皮瓣内血管密度较对照组高,血管计数后进行统计学分析,术后3天,实验组血管密度为(11.40± 1.59)对照组为(8.74±1.14),术后7天,实验组血管密度(12.66±1.78),对照组(10.1±1.2),术后 14 天,实验组(13.24±0.99),对照组(10.24±0.95)。证明血管密度随时间增长在增长,但总体来说,实验组较对照组血管密度高。研究结论:富血小板纤维蛋白可以提高随意皮瓣组织微血管密度,提高随意皮瓣成活率。
【图文】：

血小板,纤维蛋白,全血,离心管

凝胶使其排出多余的血清，既节约时间，亦可塑性，使其符合手术所需。此时逡逑所得到的即为标准的富血小板纤维蛋白膜，此过程必须保证严格的无菌操作。逡逑（图１）逡逑１０逡逑

皮瓣,毛发,实验组,质地

术后第１４天，实验组皮瓣愈合良好，皮瓣质地、颜色，毛发覆盖等与周围逡逑皮肤无异。对照组皮瓣远端坏死皮瓣界限更为明显，坏死部位无毛发生长，质硬，逡逑皮瓣蒂部毛发生长旺盛，皮瓣成活良好，与周围正常组织无明显差异。（图３邋ｅ，，ｆ）逡逑实验组逦对照组逡逑１逦２逦５逦Ｓ邋６逦７逦？邋吩逡逑Ｐ邋Ｖ、＇：逡逑术后３ｄ逦：＇丨逦卜：霸逡逑ｎ逦ｍ逡逑Ｕ：．：：．‘人…N逦逦逦邋；逡逑ｉ邋２逦３邋４逦５逦＾逦￣邋＾逦２邋Ｊｌ邋４邋５邋６邋７邋ｓ邋ｖ邋ｊ0逡逑术后７ｄ逦１逦￣邋Ｊ｜逡逑＼邋，－．…一一邋＊逦ｉ逡逑Ｉ邋ｒＪＪＪＪＡＺｍ邋．逡逑术后１４ｄ逦１逡逑图３．术后不同时间点转移皮瓣大体观逡逑１９逡逑
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R622

【参考文献】