钙敏感受体在创伤性脑损伤大鼠神经元凋亡中作用的研究

发布时间：2020-04-25 21:00

【摘要】：目的:研究钙敏感受体(Calcium-sensing receptor,Ca SR)在创伤性脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)后大鼠神经元中的表达,分析Ca SR及Caspase-3表达的变化与神经元凋亡之间的关系。方法:健康成年清洁级SD大鼠54只,按随机数字方法随机分成对照组、TBI组、抑制剂组,每组18只,每组再分为损伤后6h、24h、72 h 3个亚组,每个亚组6只。对照组给予只开骨窗不予打击处理,TBI组和抑制剂组采用改良自由落体硬脑膜撞击法建立TBI模型,抑制剂组在模型建立前连续2 d尾静脉注射Ca SR阻滞剂NPS2390(1次/d,每次10μmol/kg)。采用改良神经功能评分(m NSS)评估各组大鼠神经行为,Real-Time PCR检测损伤脑组织Ca SR、Caspase-3 m RNA的表达,Western-blot法检测Ca SR、Caspase-3蛋白的表达,Tunel法检测皮质神经元的凋亡。采用单因素方差分析对数据进行分析。结果:(1)HE染色结果显示,对照组可见脑组织结构完整,细胞排列整齐,TBI组和抑制剂组可见蛛网膜下腔出血,炎性细胞浸润。(2)神经行为学评分显示:各时间点TBI组与对照组比较m NSS评分增高,差异有统计学意义(P0.01),而三个时间点抑制剂组m NSS评分均低于TBI组(P0.01)。(3)TBI组不同时间点Ca SR m RNA及其蛋白的表达,均为24 h达高峰,组内比较差异有统计学意义(P0.01)。三个时间点TBI组Ca SR m RNA及其蛋白的表达高于对照组(P0.05),而抑制剂组Ca SR m RNA及其蛋白的表达均低于TBI组(P0.05)。各时间点TBI组Caspase-3 m RNA及其蛋白的表达在24 h达到高峰,组内比较差有统计学意义(P0.05),各时间点TBI组Caspase-3 m RNA及其蛋白的表达高于对照组(P0.05),抑制剂组Caspase-3 m RNA转录低于TBI组(P0.05),抑制剂组仅在在24h时间点Caspase-3蛋白表达与TBI组相比,差异有统计学意义(P0.01)。(4)TUNEL法检测结果显示,TBI组24 h凋亡细胞达到峰值,组内比较差异有统计学意义(P0.01)。各时间点TBI组比对照组神经元凋亡细胞指数均增高(P0.01),而抑制剂组与TBI组比较,凋亡细胞指数降低(P0.01)。(5)相关性分析显示:Ca SR、Caspase-3蛋白的表达均与细胞凋亡存在正相关(r=0.300,P0.05;r=0.371,P0.01),Ca SR蛋白的表达与Caspase-3蛋白的表达存在正相关(r=0.434,P0.01)。Ca SR、Caspase-3 m RNA转录与细胞凋亡存在正相关(r=0.641,P0.05;r=0.893,P0.01);Ca SR m RNA转录与Caspase-3 m RNA转录存在正相关(r=0.754,P0.01)。结论:在创伤性脑损伤中,Ca SR在脑损伤中表达明显增高,抑制剂NPS2390能下调Ca SR的表达,改善神经行为学评分,减少细胞凋亡。Ca SR的表达可能参与了创伤性脑损伤的病理生理过程。
【图文】：

大鼠模型,时间点,凋亡

钙敏感受体在创伤性脑损伤大鼠神经元凋亡中作用的研究表 3.2 各组大鼠模型制作后改良神经行为学评分比较（ ±s）.2 Rats neurobehavioral scores changes after traumatic brain injury鼠数（只） 6 h 24 h 6 1.50±0.55 1.33±0.82 6 13.87±0.75b13.33±0.82b16 11.83±0.98bc10.67±0.82bc1较，bP＜0.01；与 TBI 组比较，cP＜0.01；：与 6 h、24 h 时间点比较，d

统计学意义,时间点,蛋白,模型制作

与 TBI 组比较，#P<0.05 ；同一时间点 TBI 组与抑制剂组比较， P图 3.3.1.CaSR mRNA 相对表达量Figure3.3.1. Comparison of CaSR mRNA transcription in all ge PCR 检测 Caspase-3 蛋白转录脑组织 Caspase-3 mRNA 表达结果：模型制作后 6h、蛋白转录在 6h到 24h呈现上升趋势，，24h转录最为显pase-3 mRNA 各时间点比较差异有统计学意义（P＜0TBI 组 Caspase-3 mRNA 的转录高于对照组（P＜0.0spase-3 mRNA 低于 TBI 组，差异有统计学意义（P＜图 3.3.2）.3.2 各组大鼠不同时间点 Caspase-3 mRNA 的相对表达量（.3.2.Transcription of Caspase-3 mRNA were observed in all gro鼠数（只） 6 h 24 h 6 0.85±0.18 0.75±0.24 6 2.57±1.03ab4.81±0.66abaa
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R651.15

【参考文献】