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人参皂甙Rg1促进星形胶质细胞向神经元转分化的实验研究

发布时间:2020-05-15 17:34
【摘要】:目的探索人参皂甙Rg1对星形胶质细胞转分化为神经元样细胞的影响。方法首先制备SD大鼠脊髓损伤模型,一周后切取脊髓损伤组织,消化离心后用ACM(星形胶质细胞条件培养基)培养细胞,实验分成两组,一组在ACM中加入人参皂甙Rg1联合培养,另一组设为空白对照,一周后待细胞形成神经球后加入神经干细胞分化液自然分化,倒置显微镜观察两组中细胞生长形态;免疫荧光鉴定两组中神经球nestin及GFAP的表达及诱导分化后细胞的MAP-2阳性表达率;Western Blot检测两组细胞转分化培养过程中nestin及MAP-2蛋白表达量的差异。结果两组中均能培养出神经球,经免疫荧光双标鉴定两组神经球均同时表达nestin/GFAP,以及诱导分化的细胞后均可见MAP-2阳性表达,但两组中MAP-2阳性表达率不同,Rg1组为(4.39±1.00)%,而对照组为(2.63±0.76)%,统计学检测P0.05,提示Rg1组分化为神经元的潜能较对照组增高。Western Blot检测提示Rg1可以促进星形胶质细胞损伤后nestin的表达,以及分化后MAP-2的表达。结论人参皂甙Rg1可促进星形胶质细胞转分化形成神经元样细胞,为临床治疗脊髓损伤提供新的思路。
【图文】:

星形胶质细胞,联合培养,悬浮细胞,团块


人参皂甙 Rg1 促进星形胶质细胞向神经元转分化的实验研究 结 果结 果一、神经球的形态观察原代星形胶质细胞放置培养板中培养 2d 后,实验组及对照组中均可见细胞聚集现象,呈现大小不一的悬浮细胞团块,同时可以看到少许部分细胞贴壁生长。培养约一周时,可见两组中悬浮细胞团块变大,形态接近球形,周围折光性强,即神经球产生。两组间神经球形态、大小近似相同,未见明显区别。如图 1 所示。

免疫荧光,吹散,神经元,细胞


人参皂甙 Rg1 促进星形胶质细胞向神经元转分化的实验研究 结 果三、人参皂甙 Rg1 促进星形胶质细胞转分化形成的神经元收集 Rg1 组及对照组中培养一周后形成的神经球,将神经球吹打成单细胞悬液用神经干细胞培养基培养,经细胞计数后,,均匀接种在多聚赖氨酸包被的盖玻片上培养一周。待细胞铺满盖玻片后经 MAP-2 免疫荧光和 DAPI 染核测定,结果显示 Rg1组及对照组中均能看到 MAP-2 阳性表达细胞,随机每组记录 5 个视野,阳性细胞比例=阳性细胞数/总细胞数来初步计算得知,测得 Rg1 组中细胞分化为神经元比例为( 4.39 ±1.00) %,对照组中相对较少,测得比例为( 2.63 ±0.76) %。有提高的趋势,( P<0.05,n=5) 。如图 3 所示。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R651.2

【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 郭维潇;陆政峰;成茂华;沈忆新;唐胤尧;刘以礼;;人参皂甙Rg1对嗅鞘细胞迁移能力的影响[J];中华实验外科杂志;2015年07期

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1 陆政峰;人参皂甙Rg1强化嗅鞘细胞生物学行为的实验研究[D];苏州大学;2010年



本文编号:2665396

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