SB203580在大鼠的静脉移植后再狭窄的作用研究

发布时间：2020-06-02 03:41

【摘要】：目的:冠状动脉旁路移植术(CABG)是治疗多支冠脉病变的常用方法之一。而术后移植静脉的再狭窄,严重影响了患者的预后及生存年限;桥静脉的术后再狭窄是一个多机制参与的复杂过程,本课题组通过建立大鼠的颈静脉-颈动脉的移植模型,模拟CABG术后的再狭窄的过程;应用高度选择性的P38MAPK抑制剂SB203580进行干预;探讨P38MAPK通路在桥静脉再狭窄中的作用,并采取不同的用药方式探讨此药物合适的给药方法。方法:将48只SD大鼠(雌雄不拘,周龄12-14周,体重250-300g)随机分为四组:假手术组(mock surgical group,M);对照组(control group,C);一次性给药组(One-time administration O);持续性给药组(Continuous administration CA);每组12只。假手术组仅模拟手术过程,游离静脉,结扎分支,不进行断离颈静脉,移植血管操作。对照组进行同侧颈静脉-颈动脉移植。一次性给药组术前一小时给予SB203580灌胃5mg/kg,后进行同侧颈静脉-颈动脉移植。持续性给药组术后大鼠苏醒后给予SB203580灌胃3mg/kg,后进行同侧颈静脉-颈动脉移植,术后每天给予SB203580灌胃3mg/kg一日一次。各组均于术后4W取出血管,肉眼观察各组静脉变化,取新鲜桥血管固定保存后,进行HE染色,马松染色,通过显微镜计算机处理系统测定内膜、中膜的厚度及胶原蛋白的多少;运用蛋白免疫印迹法(Western blotting WB)测定移植血管中P38、P-P38、a-sma的含量;免疫组化测定移植血管中a-sma、PCNA的含量。结果:手术均成功,肉眼观察术后4周取出各组血管均有不同程度的肉芽组织增生,管壁增厚以及管腔不同程度的狭窄,其中对照组最为严重。HE染色后通过计算机图像系统分析示:对照组内膜、中膜增生厚度明显高于空白组,一次性给药组,持续性给药组,差异具有统计学意义(P0.05);一次性给药组内膜增生厚度明显高于持续性给药组、假手术组,差异具有统计学意义(P0.05);持续性给药组内膜增生厚度明显高于假手术组,差异具有统计学意义(P0.05)。通过蛋白免疫印迹法显示P38、P-P38、a-sma蛋白产物对照组明显高于空白组、一次性给药组、持续性给药组,差异具有统计学意义(P0.05);一次性给药组P38、P-P38、a-sma蛋白产物明显高于持续性给药组、空白组,差异具有统计学意义(P0.05);持续性给药组P38、P-P38、a-sma蛋白产物明显高于空白组,差异具有统计学意义(P0.05)。免疫组织化学:a-sma免疫组织化学显示空白组内膜、中膜、外模可见少量阳性细胞;对照组内膜、中膜、外膜均可见大量的阳性细胞;一次性给药组及持续性给药组可见中等量的阳性细胞表达,其中一次性给药组阳性细胞高于持续性给药组,差异具有统计学意义(P0.05)。PCNA免疫组织化学显示:对照组PCNA表达较强,全层可见增殖细胞浸润,以中膜、外膜为主,一次性给药组、持续性给药组中膜、外膜可见增殖细胞中等量表达,增殖细胞由中膜、外膜向内膜转移。结论:P38MAPK通路参与了移植静脉动脉化及再狭窄的过程,并在其中发挥了重要的作用。SB203580作为P38MAPK的抑制剂,应用于大鼠自体静脉移植模型中,对于减轻内膜及中膜的增生,提高血管通畅率有效,并且通过口服的持续性的给药较术前一次性给药对减轻血管的增生效果更佳,对于进一步研究和防治CABG术后桥静脉再狭窄提供了基因水平上的新思路以及对SB203580的用药方式提供参考。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R654.2

【参考文献】