七氟醚后处理对失血性休克复苏大鼠脑组织需肌醇酶1信号通路的影响

发布时间：2020-06-19 06:33

【摘要】：目的评价七氟醚后处理对失血性休克复苏大鼠诱发脑损伤的保护作用及其对脑组织中需肌醇酶1(inositol requiring enzyme 1,IRE1)信号通路的影响。方法健康成年雄性SD大鼠60只,体重300-320g。采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sham组):只手术置管不进行放血、回输血及七氟醚后处理;失血性休克复苏组(HSR组):只置管建立失血性休克复苏模型,不进行七氟醚后处理;七氟醚后处理组(SP组):SP 1、SP 2和SP 3组分别于失血性休克后复苏即刻给予1.2%、2.4%和3.6%三种浓度梯度七氟醚后处理半小时。采用经右侧颈总动脉放血30 min(放血量为总血容量40%),1 h后经置入PE-50管的左颈静脉半小时内回输之前抽出来的全部自身血液的方案制备失血性休克复苏大鼠模型。实验期间连续监测心率(heart rate,HR)、平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)等指标,并记录抽血前(T_0)、抽血结束即刻(假手术组于置管30min,T_1)、抽血结束后30 min(假手术组于置管60min,T_2)、血液回输前(假手术组于置管90min,T_3)和血液回输结束即刻(假手术组于置管120min,T_4)五个时间点每组大鼠的MAP值。在T_0、T_1、T_3和T_4时分别采集动脉血标本进行血气分析,记录各时间点动脉血PH值、血乳酸值(lactic acid,Lac)和碱剩余(buffuer excess,BE)。在血液回输结束后第72 h,各组随机取6只大鼠,利用水迷宫测试大鼠空间学习与记忆能力,随后取全脑组织,石蜡包埋,采用免疫组织化学法检测大鼠海马CAl区caspase-3的表达。各组余下6只大鼠于血液回输后第72 h直接处死并取海马组织,采用Western blot法检测IRE1及XBP1(X盒结合蛋白1)蛋白的表达水平。结果1.血流动力学指标五组大鼠T_0和T_4时刻MAP值组间比较差异无统计学意义(P0.05);与Sham组比较,HSR组和SP 1~3组T_(1-3)时MAP值下降(P0.05);与T_0比较,HSR组和S1~3组T_(1-3)时MAP值下降(P0.05)。2.动脉血气分析五组大鼠T_0和T_4时刻动脉血PH、Lac、BE组间比较差异无统计学意义(P0.05);与Sham组比较,HSR组及SP1~3组T_(1,3)时PH和BE降低,Lac升高(P0.05);与T_0比较,HSR组及SP1~3组T_(1,3)时PH和BE降低,Lac升高(P0.05)。3.水迷宫实验与Sham组比较,HSR组和SP1组逃避潜明显伏期延长,穿越原平台次数显著减少(P0.05),SP2组和SP3组逃避潜伏期和穿越平台次数差异没有统计学意义(P0.05)。与HSR组比较,SP2组和SP3组逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加(P0.05),SP1组上述指标比较差异无统计学意义(P0.05)。SP2组与SP3组逃避潜伏期和穿越原平台次数比较差异无统计学意义(P0.05)。4.免疫组化检测caspase-3与Sham组比较,HSR组和SP1组大鼠海马CA1区caspase-3表达增加(P0.05);与HSR组相比,SP2组和SP3组大鼠海马CA1区caspase-3表达降低(P0.05)。5.Western blot检测IRE1和XBP1与Sham组比较,HSR组和SP1组大鼠海马组织IRE1和XBP1蛋白表达均上调(P0.05);与HSR组相比,SP2组和SP3组大鼠海马组织IRE1和XBP1蛋白表达均下调(P0.05)。结论2.4%和3.6%的七氟醚后处理可减轻大鼠失血性休克复苏诱发的脑损伤,该作用机制可能与其降低脑组织中IRE1和XBP1表达有关。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R614

【参考文献】