慢病毒介导骨形态发生蛋白2转染兔骨髓间充质干细胞粘附脱钙骨基质修复股骨大段缺损

发布时间：2020-07-12 00:47

【摘要】：目的:研究兔股骨大段缺损中植入慢病毒介导人骨形态发生蛋白2转染骨髓间充质干细胞粘附脱钙骨基质后的修复效果,探寻修复股骨大段缺损的新途径。方法:选取48只新西兰大白兔,股骨中段截骨钢板内固定法制备兔左侧股骨大段缺损模型。造模成功后,随机分成A、B、C、D组,每组12只。A组无修复材料植入,B、C、D分别植入脱钙骨基质、脱钙骨基质/BMSCs、慢病毒载体介导hBMP-2/BMSCs/脱钙骨基质。造后2、4、8及12周各组分别处死3只兔子,通过苏木精-伊红染色技术、生物力学分析、X射线技术评价股骨大段缺损修复的情况。结果:(1)X射线示A、B、C、D组均有不同的骨痂修复形成,且Lane-Sandhu X射线评分ABCD组(P0.05);(2)生物力学分析结果表明造模后8、12周时C、D组组间及同正常股骨比较,均有显著意义(P0.05);(3)苏木精-伊红染色显示A组可见少量排列紊乱的骨小梁和大量的纤维组织;B组脱钙骨基质支架已降解,可见部分排列紊乱的骨小梁和大量的纤维组织;C组骨小梁已基本连接成线,开始塑形为皮质骨,髓腔再通不明显;D组已基本形成新的骨皮质,有髓腔再通。结论:骨缺损区域植入慢病毒载体介导hBMP-2/BMSCs/脱钙骨基质后能够促进骨传导、骨诱导和骨生成,对兔股骨大段缺损有较好的修复效果。
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R687.3
【图文】：

三点弯曲试验,股骨,标本,苏木精-伊红染色

图 1 三点弯曲试验的股骨标本Fig. 2 three point bending of the femur specimen1.2.6 苏木精-伊红染色分别于造模后 2、4、8、12 周骨标本中段 20mm 长标本（C、D不严重，故不影响其 HE 染色），EDTA 脱钙液中脱钙 30d，梯度乙片，行苏木精-伊红染色。于显微镜骨标本修复区域支架材料降解程度1.2.7 统计学分析

股骨,X射线,脱钙骨基质,射线

见图 2C；D 组骨痂开始塑形，部分多余骨痂被吸收，髓腔再通；D 组骨缺损修复完成，见图2D。A、B、C、D 组 4、8、12 周的 Lane-Sandhu X 射线评分均有显著差异（P < 0.05），D 组 2 周的 Lane-Sandhu X 射线评分与 A、B、C 组相比有明显差异（P < 0.05），见表 1。提示在兔股骨大段缺损修复中慢病毒介导 hBMP-2/BMSCs/脱钙骨基质效果优于单纯脱钙骨基质和 BMSCs/脱钙骨基质。随时间推移，各组 Lane-Sandhu X 射线评分依次增高，提示骨缺损的修复有一定的时间依赖性。4 周8 周12 周A B C D图 2 造模后 4/8 和 12 周各组兔股骨 X 射线结果Fig. 2 X-ray observation at 4、8、12 weeks after operation

组织学观察,苏木精-伊红染色,股骨,时间点

A 组 B 组 C 组 D 组图 3 造模后各时间点每组兔股骨标本组织学观察(苏木Fig. 3 Observation of bone trabeculars after 4、8、12 we图注：图中“*”示纤维组织，“▲”示骨小梁，“●”示髓腔。3 讨论在以往的骨缺损修复实验中，研究者骨或胫骨缺损、兔股骨缺损中植入带有间玻璃等组织工程骨对缺损进行修复，并取同时存在支架材料降解的问题[19-21]。在外者将其直接负载在支架材料上或者将目的

【参考文献】