大鼠脊髓突触体氨基酸神经递质的测定

发布时间：2020-08-05 22:15

【摘要】：目的:观察透射电镜下脊髓突触体形态,定性定量检测突触体不同处理条件下的氨基酸递质,研究Percoll密度梯度离心法所得大鼠脊髓突触体的形态是否完整及其生理活性。方法:将制得的大鼠脊髓突触体混匀后分为三组,正常温育组、氯化钾刺激组、超声细胞破碎仪破碎组;使用透射电镜观察三组不同处理下脊髓突触体的形态学改变;使用高效液相色谱仪检测在正常温育组、氯化钾刺激组和超声细胞破碎仪组脊髓突触体悬液上清液中氨基酸的类别和含量。结果:各组电镜鼠脊髓突触体图像如文中注图所示,我们得到了形态完整的大鼠脊髓突触体;大鼠脊髓突触体中含有的氨基酸递质有天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、r-氨基丁酸,虽然在脊髓匀浆离心上清液中检测到牛磺酸存在,但是突触体中并未检测到牛磺酸;在氯化钾刺激释放和正常温育条件下对比中,得出天门冬氨酸、谷氨酸释放量明显增加(P0.01),有统计学意义,甘氨酸、r-氨基丁酸呈现出增加趋势,但统计学无显著性;另外,在大鼠脊髓突触体中我们检测到有天门冬酰胺的存在,且两组之间有统计学意义;我们使用超声波细胞破碎仪破碎突触体,在同一蛋白浓度下检测氨基酸递质明显低于其他两组,这一现象仍需进一步研究。结论:大鼠脊髓突触体中含有的氨基酸递质有天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、r-氨基丁酸;Percoll密度梯度离心法所得大鼠脊髓突触体具有生理活性。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R651.2
【图文】：

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4.1 透射电镜观察各组突触体形态学改变的结果正常脊髓突触体的结构如图 1、2 中，单个的突触体包含三个部分，突触前较大，内含数个染色较深的线粒体及大量的染色较浅的空泡状的突触囊泡（囊泡中含有神经递质）；突触后较小，内不含线粒体等细胞器，在其与突触前相对的部位膜上染色较深，为突触后的标志性特点，在脑突触体中命名为致密部；两部中间为突触间隙的部分，其在正常突触体上较为明显清晰。整体的看一个正常完整的突触体，似一条大鱼欲张口吞入另一条小鱼。图 3、4 为氯化钾处理组的突触体电镜图，由图 4 可见突触体结构完整，突触前内可见较图 2 中体积略大的突触囊泡，未见线粒体，但可见一体积更大、形态规整的类圆形染色较空泡结构更深的结构；突触后染色较图 2 中致密均匀且体积也略有增大，致密部存在；突触间隙似有消失。整个突触体似一个葫芦。图 5、6 为超声细胞破碎仪破碎后的脊髓突触体，图 6 中整图中完整的突触体较少，突触体膜与图 2、4 相较连续完整性不明显，突触前中囊泡结构不明显，亦未见线粒体；突触后致密部不明显；似突触体破裂多发生在突触前部。

突触体,兰州大学,学位论文,氯化钾

3氯化钾处理组突触体透射电镜下形态，比例尺1:20000,1:50000

透射电镜,突触体,透射电镜,处理组

6超声细胞破碎仪处理组突触体透射电镜下形态，比例尺1:20000,1:50000

【参考文献】