丹红注射液联合hADSCs对脂肪颗粒移植成活率影响的研究

发布时间：2020-09-07 11:34

　　目的:通过探讨中药丹红注射液(Danhong injection,DH)联合人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,hADSCs)对脂肪移植动物模型移植脂肪颗粒(adipose granu1e,AG)成活率的影响,寻找提高自体脂肪移植(Autologous fat transplantation,AFT)成活率的新方法。方法:1处理脂肪组织,分离并体外培养hADSCs;对培养得的第三代hADSCs运用流式细胞仪进行相关抗原检测,通过研究其相关抗原表达情况确定细胞性质。2制作AG并据干预因素不同分成四组,A组为单纯AG组、B组为AG+hADSCs组、C组为DH+AG组、D组为DH+hADSCs+AG组。实验裸鼠随机分组,每组6只,运用脂肪颗粒注射填充法构建脂肪移植裸鼠动物模型;后AB两组每日腹腔注射生理盐水,CD两组每日注射等量DH。移植术后15 d、30 d每组分别处死3只裸鼠,测量移植物体积,显微镜下观察移植物纤维增生情况和新生毛细血管数量、通过免疫组织化学切片法(Immunohistochemistry sections,IHC)检测移植物血管的密度值。结果:1.hADSCs培养7-9 d后培养瓶中见到有大量梭形细胞,14 d左右见梭形细胞呈旋涡状或束状。原代细胞达到80%融合时进行传代。用流式细胞术对第三代hADSCs进行相关抗原检测:表明CD29、CD44、CD90的表达率均在92%以上;CD31、CD45、CD146阳性率均小于6%(Fig.5),是几乎不表达的,证明该实验中所培养的细胞确实是h ADSCs。2.移植术后15 d,可见移植物表面含少量毛细血管的包膜形成,四组对比:D组移植物新生毛细血管最多,A组最少,B、C两组介于A、D之间。移植术后30 d,对移植物的体积比较:A与B,A与C,A与D,B与D,C与D之间的差异均具统计学意义(P0.05),B组与C组之间的差异无统计学意义(P0.05),即D组最大,A组最小,B、C两组介于A、D之间。3.对移植术后15 d移植物血管密度值进行两两比较,A与B,A与C,A与D,B与D,C与D之间的差异均具统计学意义(P0.05);B与C之间的差异无统计学意义(P0.05),认为D组最高,A组最低,B、C两组组介于A、D组之间。结论:DH与h ADSCs双因素联合协同自体脂肪移植,优于单因素干预,动物模型脂肪移植物成活率提高,且移植物周围新生毛细血管的密度更大。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R622
【部分图文】：

形态图,形态

图 1 原代 hADSCs 培养 24h 的形态(×100) The morphology of hADSCs cultured for 24 hours at passage (×100)

形态图,形态

图 2 原代 hADSCs 培养 7d 的形态(×100) The morphology of hADSCs cultured for 7 days at ppassage (×100)

形态图,形态

图 4 第 3 代 hADSCs 培养 48h 的形态(×100)morphology of hADSCs cultured for 5 days at 3rd pas

【参考文献】