EPO对SD大鼠心脏移植术后血清炎性细胞因子IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8水平的影响

发布时间：2020-09-21 11:00

　　 目的:课题组前期研究发现SD大鼠心脏移植术后心肌组织间出现了大量的炎性细胞浸润现象,严重影响了心脏移植术后的心功能,因此本次实验拟以SD大鼠为研究对象,通过检测心脏移植后血清IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8炎性细胞因子表达水平及炎性细胞的浸润情况,探讨EPO能否对心脏移植术后IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8表达产生影响,从而减轻心脏移植术后炎性细胞浸润程度,发挥一定的心肌保护作用。方法:1.健康的雄性SD大鼠(n=90),采用随机数字表法分为假手术组(A组,n=18)、单纯心脏移植组(B组,n=36,供体18只,受体18只)、心脏移植+EPO组(C组,n=36,供体18只,受体18只),假手术组仅做开腹手术,单纯心脏移植组单纯行腹部异位心脏移植,心脏移植+EPO组行腹部行异位心脏移植并予以EPO干预,各组分术前1d、术后第1d、术后第5d三个批次,各组每批次6只大鼠(注:B组及C组供体、受体各6只/批次),获取各组各批次的血液及供心组织标本,血液标本离心获取上层血清检测心肌酶,检测IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8等炎性细胞因子指标,心肌组织进行HE染色观察炎性细胞浸润、分布情况。2.模型简述:供体异氟醚气体麻醉后平卧于恒温手术床,开腹后于腔静脉注射肝素盐水0.5ml(浓度20IU/ml)使大鼠全身肝素化!剪开胸腔暴露心脏,分别游离并剪断胸主动脉和肺动脉(尽量留长),束扎其余血管并剪断,取出心脏置于冰盐水中备用;受体麻醉满意后取腹部正中切口,充分暴露游离腹主动脉及下腔静脉至少4mm,微血管夹阻断后,各剪出适当大小吻合口,取出供体心脏,其主动脉与受体腹主动脉、肺动脉与下腔静脉分别做端侧连续吻合,完成后慢慢恢复血供,数分钟后移植心恢复跳动,手术成功后关腹,放入笼中常规给水及食物,恒温保暖直至苏醒。结果:1.模型建立:(1)建立模型过程中有两例因腹部切口缝合原因导致肠梗阻死亡,有一例因麻醉意外死亡,在建模过程中各组、各时间点存活情况比较无差异(P0.05)。(2)心脏搏动情况:因A组腹部未行心脏移植,故无法触及心脏搏动;心脏移植术后第1d,B组与C组移植心搏动强度无明显变化;术后第5d,B组较C组移植心搏动强度明显减弱。(3)心肌酶情况:心脏移植术后第1d、第5d,B组与A组相比,B组血清磷酸肌酸激酶、乳酸脱氢酶明显升高(P0.05);心脏移植术后第1d、第5d,B组与C组相比,B组血清磷酸肌酸激酶、乳酸脱氢酶明显升高(P0.05)。2.HE染色情况:A组、B组、C组各组术前第1d的HE染色图片心肌细胞的结构均完整,心肌纤维排列规则,细胞间少量炎性细胞浸润,无局部出血、坏死;B组术后1d心肌细胞肿胀、破坏严重,肌纤维排列极为不规则,炎性细胞浸润增多,C组术后第1d出现少量炎性细胞浸润;B组术后第5d炎性细胞浸润进一步增加,心肌细胞坏死严重程度增加,心肌纤维结构排列紊乱,C组术后第5d炎性细胞浸润有少量增多,但心肌结构排列仍然较为规则。3.IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8炎性细胞因子指标变化情况:心脏移植术后第1d、第5d,B组与C组相比,B组血清IL-2、IL-8水平明显升高,C组IL-10、TGF-β水平升高明显(P0.05)。结论:EPO对血清抑炎性细胞因子IL-10、TGF-β及促炎性细胞因子IL-2、IL-8的水平起调节作用,通过减轻心脏移植术后血清致炎性细胞因子的水平,发挥心肌保护作用。
【学位单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R654.2
【部分图文】：

遵义医学院硕士学位论文 陈福晖121.3 主要实验流程：图 1 主要实验流程图1.4 统计学处理研究结果的具体数据采用SPSS18.0软件系统分析处理，以均数±标准差（x ±s）表示计量数据，多组间比较用单因素方差分析，组间两两比较用LDS检验，方差不齐时用Brown-Forsythe或Welch校正，同一组内不同时间点用重复测量方差分析，χ2检验分析计数资料百分率，以P<0.05为差异有统计学意义。

注：与 B 组术后第 1d 比较，▲P<0.05；与 B 组术后第 5d 比较，#P<0.05（2）心脏移植术后第 1d，A 组与 B 组相比，B 组血清乳酸脱氢酶的倍（P<0.05）；心脏移植术后第 5d，A 组与 B 组相比，B 组血清水平升高 6.5 倍（P<0.05）；心脏移植术后第 1d，C 组与 B 组相比氢酶的表达水平升高 1.8 倍（P<0.05）；心脏移植术后第 5d，C 组血清乳酸脱氢酶的表达水平升高 1.8 倍（P<0.05）（见表 5 及图 3表 5 各组不同时间点血清乳酸脱氢酶水平变化（ x ±s，n=6）（浓度 I组别 术前 1d 术后第 1d A 组（假手术组） 135.73±13.76 144.26±20.15▲1B 组（心脏移植组） 142.63±16.45 1025.15±13.49 ▲图 2 不同时间点各组血清磷酸肌酸激酶水平变化（n=6）

注：与 B 组术后第 1d 比较，▲P<0.05；与 B 组术后第 5d 比较，#P<0.05观察时间(d)图 3 不同时间点各组血清乳酸脱氢酶水平变化（n=6）

【参考文献】

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本文编号：2823404