射频消融髓核成形术对退变椎间盘炎症和免疫反应的影响

发布时间：2020-11-16 04:34

　　目的:1、探讨射频消融髓核成形术对退变椎间盘局部炎性因子表达的影响;2、评价射频消融髓核成形术对退变椎间盘免疫反应的影响。方法:1、选取30只新西兰大白兔,将家兔腰2-6椎间盘随机分为四组:对照组(C组)、假手术组(S组)、正常-手术组(N组)及退变手术组(D组)。纳入退变-手术组的椎间盘节段利用纤维环针刺法制备椎间盘退变模型。造模成功后根据分组给予相应间盘不同手术处理,并于术后即刻、7d、14d、21d、28d处死6只动物;2、HE染色评价各组椎间盘血管、胶原及组织形态学变化;采用免疫组化染色分析各组间盘不同时间点基质金属蛋白酶表达水平,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)定量分析各时间点椎间盘内IL-1、TNF-α的含量;3、采用免疫荧光染色半定量分析各实验组不同时间点CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、IgG、IgM表达水平。结果:1、HE染色显示:不同时间点C组椎间盘纤维环完整,胶原纤维与软骨细胞均匀分布,无明显炎性细胞浸润;S手术组髓核组织结构紊乱,软骨细胞罕见,胶原纤维呈团块状,方向混乱,可见大量红细胞浸润,并随时间推移逐渐增加;D组和N组可见烧灼坏死样物质,髓核结构紊乱,软骨细胞较少,部分胶原纤维呈团块状聚集,髓核内可见少量红细胞浸润。2、免疫组化染色结果显示:C组髓核内未见明显MMP-1、MMP-3浸润颗粒,术后不同时间点MMP-1、MMP-3阳性率为0%~10%;D组MMP-1、MMP-3分别由术后即刻时100%、100%下降至术后4周时的50%和55%;正常-手术组随时间推移MMP-1、MMP-3表达虽呈上升趋势,至28d时两指标阳性率分别为65%和55%,与同时间点假手术组相比差异有统计学意义。3、ELISA实验结果显示:C组术后不同时间点髓核局部IL-1、TNF-α呈稳定低水平表达;CN能明显降低退变椎间盘内各炎性因子的表达水平,IL-1由术后即刻43.91±2.82ng/L下降至28d时31.76±1.34ng/L,TNF-α由术后即刻50.00±4.22ng/L下降至28d时34.14±3.50ng/L;至28d时N组与D组各指标组间差异无统计学意义。4、免疫荧光染色显示:C组髓核内未见明显免疫球蛋白和免疫细胞浸润;与术后即刻相比,D组在术后28d时免疫指标显著下降,每高倍镜下CD4~+T细胞、CD8~+T细胞细胞数分别由22.39±6.79、28.22±7.81下降至16.50±5.82、20.22±5.79,IgG、IgM高倍镜下绿通道下灰度值分别由49.08±7.99、44.94±10.70下降至25.53±6.04、25.41±7.95,差异有统计学意义。结论:1、射频消融髓核成形术能显著降低退变椎间盘炎性因子表达水平,并抑制退变椎间盘局部免疫反应。2、射频消融髓核成形术可能通过抑制退变椎间盘局部炎症和免疫反应缓解椎间盘退变患者疼痛症状。3、正常组椎间盘行射频消融髓核成形术后出现免疫细胞浸润、炎性因子分泌、基质金属蛋白酶的表达。这可能是射频消融髓核成形术后患者机械压迫较轻但临床症状反复的原因之一。
【学位单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R687.3
【部分图文】：

整体观,家兔,脊柱,腰椎