TLR3配体Poly-IC在大鼠脊髓缺血再灌注损伤后炎性反应中的脊髓保护作用

发布时间：2020-11-18 16:26

　　 背景在临床上,脊髓缺血再灌注损伤是一种严重的中枢神经系统损伤性疾病,是脊柱损伤最严重的并发症,其病因较多,常因交通事故,高空坠落,运动伤等造成,另外因脊柱长期慢性疲劳,过度负重劳累等引起的脊柱退行性变,椎间盘退变并突出,黄韧带增生钙化等,压迫相应阶段脊髓组织,神经根等,血供受限,引起髓内信号改变,组织细胞变性坏死等,继而出现肢体皮肤感觉异常及运动功能障碍。不同的脊髓阶段受损伤,其临床症状也不相同,脊髓损伤多以高能量伤为主,患者常常遗留有不同程度的肢体功能障碍,因其死亡率较高,临床干预手段有限,往往导致损伤阶段以下肢体严重功能障碍。脊髓损伤的同时血供也受到一定的限制,当经过手术或药物治疗后,脊髓的血供等重新恢复后,造成营养过剩,症状较前进一步加重,这种现象就是脊髓缺血再灌注损伤。相关研究表明,多聚肌苷酸多聚胞苷酸(Poly-IC)为Toll样受体3(TLR3)的配体,其预处理对缺血性脑病和肾脏再灌注损伤有保护作用,研究发现其可减少缺血再灌注区域的梗死面积、减轻组织水肿、改善神经功能及降低免疫炎性反应。实验拟通过建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型,应用Poly-IC,观察其对损伤脊髓组织细胞凋亡、水肿及相关炎性因子表达的影响,为进一步研究治疗脊髓缺血再灌注损伤的药物提供新的依据。目的拟通过建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型,通过腹腔注射Poly-IC,观察损伤脊髓阶段组织细胞凋亡,水肿及相关炎性因子表达情况,来探讨其在脊髓缺血再灌注损伤后的是否有一定的脊髓保护作用。方法72只成年健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,应用随机抽样法分为假手术组、缺血再灌注组、Poly-IC治疗组。假手术组只做腹腔打开,后两组打开腹腔后,夹闭左肾动脉起始水平近心端及左、右髂总动脉分叉水平腹主动脉,60min后再灌注,关闭腹腔,分别给予缺血再灌注组腹腔注射0.1ml生理盐水,Poly-IC治疗组按体质量1.25μg/g,给予Poly-IC溶液。三组大鼠分别于造模后6h、12h、24h、48h检测神经运动功能学评分(BBB评分),酶联免疫分析法(ELLISA法)检测各时间点脊髓组织中肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素1β(IL-1β)及干扰素β(IFNβ)的含量;各组造模后48h行免疫组化检测核转录因子(NF-κB)及白介素10(IL-10)的表达,应用TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)染色显示脊髓组织缺血坏死面积,应用HE染色光镜下观察脊髓组织病理生理形态学改变。结果各组造模成功后48h,与缺血再灌注组(3.8±0.75)相比,Poly-IC治疗组(9.4±0.49)大鼠BBB评分显著提高(P0.01),随着时间进展其肢体功能活动逐渐恢复,与假手术组(20)相比,缺血再灌注组与Poly-IC治疗组大鼠均有不同程度的肢体功能活动障碍(P0.01);Poly-IC治疗组脊髓组织损伤明显减轻,缺血坏死面积明显减少,NF-κB阳性表达降低、IL-10表达升高;各组造模成功后48h取材,应用酶联免疫分析法结果显示,缺血再灌注组IFNβ含量(55.65±4.02),TNFα含量(201.82±2.18)、IL-1β含量(50.59±1.47),与之相比Poly-IC组IFNβ含量(117.23±6.06)升高(P0.01),TNFα含量(190.45±4.16)降低(P0.01)、IL-1β含量(39.27±2.48)降低(P0.01),说明大鼠脊髓缺血再灌注损伤后应用Poly-IC能减轻脊髓损伤,改善肢体活动功能状态。结论Poly-IC能减少大鼠脊髓缺血再灌注损伤后炎性因子,减轻脊髓免疫炎症效应,对伤后脊髓神经细胞起到保护效应。
【学位单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R651.2
【部分图文】：

附图及附表表 1 各组大鼠脊髓缺血再灌注损伤后运动功能评分 ( x±s ,n=6)分组 假手术组 缺血再灌注组 Poly-IC 组 t 值6h 20 1.4±0.49a3.2±0.40ab4.24312h 20 2.8±0.75a5.4±0.49ab6.51724h 20 3.6±1.02a7.0±0.63ab7.21648h 20 3.8±0.75a9.4±0.49ab4.355Table.1 BBB score of rats with spinal cord ischemia-reperfusion injury in different groups.注：a 为与假手术组相比 P<0.01，b 为与缺血再灌注组相比 P<0.01，t 值为缺血组与Poly-IC 组。
【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 吴超;于涛;王振宇;段丽萍;;脊髓损伤后神经源性肠功能障碍的发生机制[J];中国临床神经外科杂志;2017年04期

2 Li-jie Xie;Jin-xiu Huang;Jian Yang;Fen Yuan;Shuang-shuang Zhang;Qi-jing Yu;Ji Hu;;Propofol protects against blood-spinal cord barrier disruption induced by ischemia/reperfusion injury[J];Neural Regeneration Research;2017年01期

3 李顺清;;溃疡性结肠炎患者肠道菌群含量以及细胞因子、TLRs分子表达情况的检测[J];海南医学院学报;2017年05期

4 Jian-an Li;Chun-fang Zan;Peng Xia;Chang-jun Zheng;Zhi-ping Qi;Chun-xu Li;Zhi-gang Liu;Ting-ting Hou;Xiao-yu Yang;;Key genes expressed in different stages of spinal cord ischemia/reperfusion injury ischemia/reperfusion injury[J];Neural Regeneration Research;2016年11期

5 林超;卢国艳;;呼吸道疾病患儿血液中EB病毒IgM抗体及病毒DNA感染的临床分析[J];国际病毒学杂志;2016年03期

6 刘雪萍;王爱兰;李佳静;;EB病毒感染性儿童传染性单核细胞增多症80例临床分析[J];陕西医学杂志;2016年05期

7 Metin Unlu;Zeynep Aktas;Pinar Uyar Gocun;Sevil Ozger Ilhan;Murat Hasanreisoglu;Berati Hasanreisoglu;;Neuroprotective effect of systemic and/or intravitreal rosuvastatin administration in rat glaucoma model[J];International Journal of Ophthalmology;2016年03期

8 邢晓辉;李力仙;郭天林;梁里昂;贾玉龙;刘龙;;脊髓缺血再灌注损伤的防治概况[J];现代生物医学进展;2016年05期

9 蔡炳冈;朱进;汪茂荣;;Toll样受体4信号通路研究进展[J];医学研究生学报;2015年11期

10 曾小威;李世刚;;类风湿性关节炎治疗及免疫分子机制研究进展[J];中华实用诊断与治疗杂志;2015年11期

相关博士学位论文 前3条

1 李昕;Toll样受体2、4和9在SLE患者外周血和骨髓单个核细胞的表达及其意义[D];天津医科大学;2014年

2 王鹏飞;TLR3配体Poly-IC后处理对脑缺血再灌注损伤的治疗效应及其机制研究[D];第三军医大学;2014年

3 潘琳娜;TLR3介导的TRIF信号通路在脑缺血预适应炎症抑制中的作用研究[D];华中科技大学;2013年

本文编号：2888922