低氧诱导人骨肉瘤MNNG/HOS细胞转分化为血管内皮样细胞的研究

发布时间：2021-01-11 08:10

　　【目的】血管内皮细胞是形成肿瘤新生血管的重要组成部分,与肿瘤的发展及转移密切相关,因此本课题旨在探讨低氧条件下人骨肉瘤MNNG/HOS细胞是否可转分化为血管内皮样细胞,并进一步探讨其分子机制。【方法】1.将人骨肉瘤MNNG/HOS细胞在各组不同条件下培养,观察其是否出现血管内皮细胞所具有典型的“铺路石”外观;应用3D培养技术,观测是否出现网状结构;应用RT-PCR技术,从m RNA水平检测内皮细胞所特有的标记物（CD31、CD34、v WF）的表达情况;采用细胞免疫荧光技术,从蛋白质水平检测CD31、CD34、v WF的表达情况。2.将人骨肉瘤MNNG/HOS细胞在各组不同条件下培养96小时后,接种于裸鼠皮下,构建裸鼠人骨肉瘤异种移植瘤模型,接种49天后,取下异种移值瘤并予抗人的CD31抗体进行免疫组织化学染色,检测其异种移植瘤血管内皮细胞是否有来源于人骨肉瘤MNNG/HOS细胞。3.将体外各组不同条件下培养的人骨肉瘤MNNG/HOS细胞株,应用流式细胞仪进行分析,检测能被CD133抗体染色的细胞的比例,应用q PCR技术检测干细胞基因Oct4和Nanog转录水平;接种于裸鼠皮下,观察... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

人骨肉瘤MNNG/HOS细胞诱导转分化96小时后的形态学变化

25图 1-2-1 在 Matrigel 胶上培养时，常氧组的人骨肉瘤 MNNG/HOS 细胞培养的形态学变化，在接种 96 小时后，仍然未见网状结构形成（10×）。

26图 1-2-2 在 Matrigel 胶上培养时，常氧对照组的人骨肉瘤 MNNG/HOS 细胞培养的形态学变化，在接种 96 小时后，仍然未见网状结构形成（10×）。


本文编号：2970409