人脂肪干细胞外囊泡辅助脂肪移植技术应用与优化研究

发布时间：2021-01-21 17:14

　　【目的】探讨利用脂肪间充质干细胞外囊泡（ADSC-EV）辅助脂肪移植,提高移植脂肪体积保留率的可行性及相关机制,并探索利用延迟注射策略进行优化的可能性。【方法】1.取20-40岁女性腹部水动力吸脂所得脂肪颗粒,通过漂洗、酶解消化、贴壁分离法获得脂肪间充质干细胞（ADSC）,进行传代培养及鉴定。获取ADSC培养上清液,梯度超高速离心获取ADSC-EV。利用透射电镜、PKH26染色、nanosight、western blot等检测ADSC-EV的理化性质。体外利用ADSC-EV进行人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的成管及划痕实验,探究ADSC-EV的体外促成管效应,以证明其具有促血管形成作用,并利用RNA深度测序分析其可能的机制。2.选取裸鼠皮下人脂肪移植模型（n=16）,分为空白组（0.35m L脂肪）,EV组（0.35m L脂肪+7μg EV）。于1个月,3个月后取材,测量移植物湿重及体积,HE切片观察脂肪组织形态、组织纤维化及坏死情况,CD31染色计量血管形成数目,CD206染色检测脂肪组织炎症反应情况。3.选取裸鼠皮下脂肪移植模型（n=24）,分为空白组（0.35m L脂肪）,E... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ADSC鉴定A)ADSC光镜下生长形态

ADSC-EV鉴定

图 3. HUVECs 对 ADSC-EV 的摄取将 ADSC-EVs 用红色荧光标记后与 HUVECs 共培养，4h 后观察可见 EV 聚集于 HUVECs细胞核周围，提示 EV 被细胞所摄取（标尺：2 μm).Fig 3. Cellular Uptake of ADSC EVs. HUVECs were incubated with PKH-26(red)-labeled ADSC-EVs for 4 h. The nuclei of HUVECs were stained by DAPI(blue). Separate and merged channels of structured illumination microscopy areshown. Scale bars: 2 μm.3.4 ADSC-EV 体外促成管效应观察


本文编号：2991572