HA-Au NPs对大鼠骨关节炎软骨细胞生物学影响的初步研究

发布时间：2021-03-09 08:24

　　研究目的:制备透明质酸-金纳米粒子（HA-Au NPs）复合物,在体外初步探究HA-Au NPs复合物对大鼠骨关节炎软骨细胞IL-1、TNF-α、MMP-13的mRNA表达及凋亡的影响。研究方法:1、分别采用三种不同的方法制备出不同形状的Au NPs,观察三种Au NPs的溶液颜色,通过紫外可见分光光度计检测Au NPs特征吸收峰,透射电子显微镜观察Au NPs形貌,CCK-8检测Au NPs的细胞毒性;2、制备HA-Au NPs复合物,观察HA-Au NPs的溶液颜色,通过紫外可见分光光度计检测HA-Au NPs特征吸收峰,透射电子显微镜观察HA-Au NPs形貌;3、选用4只8周龄SD大鼠随机分成2组,其中2只SD大鼠采用左膝关节前交叉韧带+内侧副韧带切断术造模（OA造模组）,另外2只SD大鼠只切开左膝关节,不做任何韧带切断（Sham对照组）;8周后分别获取2组左膝关节骨关节炎原代软骨细胞;4、采用Ⅱ型胶原蛋白免疫细胞化学染色、甲苯胺蓝染色和阿利新蓝染色对原代软骨细胞进行鉴定;5、将培养的第二代软骨细胞分成5个组:分别为A组（Sham对照组）、B组（OA对照组）、C组（OA+HA组... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

三种AuNPs溶液颜色A：球状AuNPs溶液；B：棒状AuNPs溶液；C：雪花状AuNPs溶液

图 2.1 三种 Au NPs 溶液颜色A：球状 Au NPs 溶液；B：棒状 Au NPs 溶液；C：雪花状 Au NPs 溶液2 三种 Au NPs 吸收光谱三种不同形状 Au NPs 吸收图谱不同，球状 Au NPs 可见吸收光谱在 5一个吸收峰；棒状 Au NPs 可见吸收光谱有两个吸收峰，分别在 500m 处；雪花状 Au NPs 可见吸收光谱在 560nm 有一个吸收峰（图 2.2）

92.3.3 三种 Au NPs 溶液透射电子显微镜图从透射电镜图可看到球状Au NPs呈圆球状，周围光滑，大小均一（图2.3A）；棒状 Au NPs 呈短棒状，均匀分布，大小均一（图 2.3B）；雪花状 Au NPs 呈雪花状，形状不规则（图 2.3C）。图 2.3 三种 Au NPs 透射电镜图A：球状 Au NPs；B：棒状 Au NPs；C：雪花状 Au NPs2.3.4 三种 Au NPs 毒性研究三种Au NPs对小鼠L929细胞毒性研究结果表明，球状Au NPs在25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL 浓度下吸光度明显高于棒状、雪花状 Au NPs，说明球状Au NPs 的细胞毒性明显小于另外两种材料。另外，我们发现球状 Au NPs 材料在 100μg/mL 吸光度明显高于另外三组，说明球状 Au NPs 材料在 100μg/mL 浓度下细胞毒性最小（p<0.05）（图 2.4）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]骨关节炎发病机制和治疗的最新进展[J]. 郑晓芬.  中国组织工程研究. 2017(20)
[2]骨性关节炎大鼠模型中透明质酸的表达水平[J]. 朱蓝玉,秦彦国,黄卫东,李光.  中国老年学杂志. 2013(10)
[3][18F]氟标突触结合蛋白I C2A片段和重组膜联蛋白作为凋亡分子探针的比较研究[J]. 付彤,侯彦杰,方纬,华子春,张明荣,王峰.  上海医学影像. 2012(04)
[4]MRI观察超顺磁性纳米颗粒标记的Annexin V体外检测细胞凋亡[J]. 李宗芳,刘流,田伟,滕皋军,张宇,葛玉卿,王福科.  中国医学影像技术. 2009(05)
[5]p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡的影响[J]. 秦泗通,蒋青,黄际河,刘和风,陈蔚东.  山东医药. 2008(06)

硕士论文
[1]Piezo1蛋白通过MAPK信号通路介导软骨细胞凋亡的机制研究[D]. 李晓飞.青岛大学 2017
[2]基质细胞衍生因子-1对兔膝关节软骨细胞增殖和凋亡的影响[D]. 王世东.山西医科大学 2013



本文编号：3072574