EphA7在骨肉瘤中的表达及对MG-63细胞生物学作用的研究

发布时间：2021-04-19 06:06

　　背景与目的:EphA7是在机体正常功能活动中起着关键影响的膜蛋白,其经常发挥作用的场所是在细胞膜,但它在骨肉瘤中起着何种作用,还未被进行相关研究。因此本实验采取测定45例患者的骨肉瘤组织中EphA7的含量情况,并且通过相关的方法去探究EphA7是否对人骨肉瘤MG-63细胞的一些生物学作用产生影响。从而了解EphA7蛋白在骨肉瘤中所起的作用。方法:将45例骨肉瘤病人的骨肉瘤组织和对应的癌旁正常组织分别进行收集,然后放在液氮中储存。培养人骨肉瘤MG-63细胞,按照siRNA Reagent System试剂盒说明去转染人骨肉瘤MG-63细胞,并分成siRNA-EphA7组（EphA7-siRNA转染）、siRNA-Control组（阴性对照siRNA转染）和空白组（未转染）。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）去测定组织中EphA7的mRNA表达情况,用蛋白质印迹法（Western blot）去测定细胞中EphA7的蛋白表达情况。采用细胞计数试剂盒（cel... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

骨肉瘤组织与癌旁正常组织中EphA7的mRNA表达Figure3-1mRNAexpressionsofEphA7inosteosarcomaandadjacentnormaltissues

兰州大学硕士学位论文EphA7在骨肉瘤中的表达及对MG-63细胞生物学作用的研究18图3-2骨肉瘤组织及癌旁正常组织中EphA7的蛋白水平Figure3-2ProteinlevelofEphA7inosteosarcomaandadjacentnormaltissuesA:Osteosarcomatissue;B:Adjacentnormaltissues;*:P<0.05,comparedwithadjacentnormaltissues3.3转染后人骨肉瘤MG-63细胞的荧光表达采用荧光显微镜对转染siRNA-EphA7、siRNA-Control，以及未转染的MG-63细胞中的荧光表达情况进行观测。因为siRNA携带有绿色荧光标记基因，所以转染后的细胞会呈现出绿色荧光。通过观察可以发现，转染siRNA-EphA7、siRNA-Control的MG-63细胞中表现出绿色的荧光，证明转染成功，而未转染的MG-63细胞中无绿色荧光。图3-3荧光显微镜观察转染后的人骨肉瘤MG-63细胞荧光表达情况Figure3-3FluorescenceMicroscopyObservationofFluorescenceExpressionofTransfectedHumanOsteosarcomaMG-63CellsA:siRNA-EphA7group;B:siRNA-Controlgroup;C:Blankgroup

兰州大学硕士学位论文EphA7在骨肉瘤中的表达及对MG-63细胞生物学作用的研究18图3-2骨肉瘤组织及癌旁正常组织中EphA7的蛋白水平Figure3-2ProteinlevelofEphA7inosteosarcomaandadjacentnormaltissuesA:Osteosarcomatissue;B:Adjacentnormaltissues;*:P<0.05,comparedwithadjacentnormaltissues3.3转染后人骨肉瘤MG-63细胞的荧光表达采用荧光显微镜对转染siRNA-EphA7、siRNA-Control，以及未转染的MG-63细胞中的荧光表达情况进行观测。因为siRNA携带有绿色荧光标记基因，所以转染后的细胞会呈现出绿色荧光。通过观察可以发现，转染siRNA-EphA7、siRNA-Control的MG-63细胞中表现出绿色的荧光，证明转染成功，而未转染的MG-63细胞中无绿色荧光。图3-3荧光显微镜观察转染后的人骨肉瘤MG-63细胞荧光表达情况Figure3-3FluorescenceMicroscopyObservationofFluorescenceExpressionofTransfectedHumanOsteosarcomaMG-63CellsA:siRNA-EphA7group;B:siRNA-Controlgroup;C:Blankgroup

【参考文献】：
期刊论文
[1]Eph/ephrin与中枢神经可塑性[J]. 余剑,曾进胜.  中国临床康复. 2002(21)



本文编号：3146989