KLD-12多肽/TGF-β1纳米纤维凝胶对纤维环细胞增殖、表型及功能影响的实验研究

发布时间：2021-06-11 18:08

　　目的:本实验旨在探究KLD-12多肽/TGF-β1纳米纤维凝胶在体外实验中对兔纤维环细胞增殖、表型及功能的影响,寻找修复椎间盘退变的理想种子细胞、细胞支架及生长因子。方法:胰蛋白酶消化法提取6月龄新西兰大白兔腰椎纤维环内层细胞,体外培养至第3代,与KLD-12多肽纳米纤维凝胶及TGF-β1复合,制备KLD-12多肽/TGF-β1/纤维环细胞纳米纤维凝胶（实验组）和KLD-12多肽/纤维环细胞纳米纤维凝胶（对照组）,体外培养14 d。倒置显微镜观察凝胶内细胞形态变化;细胞计数试剂盒（cell count kit 8,CCK-8）法检测细胞增殖活性;钙黄绿素（Calcein-AM）/碘化丙啶（PI）双荧光染色观察凝胶内活细胞与死亡细胞,并计算活细胞比率;阿尔新蓝法检测培养基中葡萄糖胺聚糖（Glycosaminoglycan,GAG）含量;免疫荧光染色观察Ⅱ型胶原分泌情况;实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-q PCR）检测纤维环细胞中Ⅱ型胶原及聚蛋白多糖（Aggrecan）基因表达情况。结果:（1）倒置显微镜观察复合于凝胶中的纤维环细胞呈圆形,少... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

【文章页数】：50 页

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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3225028