17β-雌二醇通过GPR30/PI3K/Akt信号通路介导影响ATDC5软骨细胞线粒体自噬的研究

发布时间：2021-06-27 14:49

　　目的:G蛋白耦联受体（GPR30）是一种雌激素膜受体,存在于多种细胞系中,能介导细胞进行快速的信号传导。PI3K/Akt是一种重要的信号传导通路,参与多种细胞生理调节,与细胞自噬相关。线粒体自噬存在于多种细胞中,通常对细胞起保护作用。关节软骨破坏是骨性关节炎（OA）的主要特点,软骨细胞线粒体自噬与OA发病密切相关。通过体外小鼠ATDC5软骨细胞培养,检测GPR30表达,观察雌激素对GPR30表达的影响。分析对照组和实验组中LC-3、TOM20、Hsp60、Akt、mTOR、P38和JNK的表达,观察ATDC5软骨细胞的活力和增殖情况。使用GPR30阻滞剂或PI3K阻滞剂对ATDC5软骨细胞进行干预,研究17β-雌二醇对线粒体自噬的影响。研究报道OA的发病率逐年上升,严重妨碍患者生活质量,给社会造成了严重经济负担。虽然雌激素在治疗骨质疏松以及OA方面得到了证实,但作用机制尚不明确。通过体外小鼠软骨细胞的培养研究,探讨17β-雌二醇通过GPR30/PI3K/Akt途径介导,抑制ATDC5软骨细胞线粒体自噬的作用机制,为保护和改善软骨细胞功能、OA的治疗提供理论基础。方法:小鼠软骨原代细胞系... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

117β-雌二醇对ATDC5软骨细胞GPR30表达的影响

.1.2 17β-雌二醇对 ATDC5 软骨细胞 GPR30 表达的影响，GPR30 分布含有 17β-雌二醇（10- 7mol/L）处理细胞 24 h，运用 IF 检测对照组和实验组 GPR30 的布水平。与对照比较，*p<0.05，有明显统计学差异。（GPR30 红色，胞核蓝色） 17β-雌二醇使 ATDC5 细胞 LC-3 的表达减少、TOM20 和 Hsp60多为了解 17β-雌二醇对线粒体自噬相关蛋白活性的影响，本研究通过 wester了 LC-3、TOM20 和 Hsp60 蛋白的表达。与对照组相比，用 17β-雌二醇处C5 软骨细胞中 LC-3 的表达水平显著降低；而应用 17β-雌二醇和（或）GKi 对 ATDC5 细胞 LC-3 的表达没有显著改变（图 3.2.1A）。与对照组相比-雌二醇处理的 ATDC5 软骨细胞 TOM20 和 Hsp60 的表达水平升高；而 17β（或）G15 或 PI3Ki 对 TOM20 和 Hsp60 的表达没有明显影响（图 3.2.1B、

17β-雌二醇处理的 ATDC5 软骨细胞 TOM20 和 Hsp60 的表达水平升高；而 17β-雌二醇和（或）G15 或 PI3Ki 对 TOM20 和 Hsp60 的表达没有明显影响（图 3.2.1B、C）。图3.2.1 17β-雌二醇、G15和PI3Ki对LC-3、TOM20和Hsp60自噬相关蛋白的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]雌激素与骨关节炎[J]. 卢敏强,钟庆,贾兆锋,徐晓,段莉,王大平.  国际骨科学杂志. 2018(01)
[2]线粒体自噬对新生大鼠缺氧缺血脑损伤的影响[J]. 李明熹,屈艺,母得志.  中国当代儿科杂志. 2017(02)
[3]雌激素的来源及其在骨代谢中的作用[J]. 王俊玲,黄思敏,梁启瑶,魏秋实,谭新,邓伟民.  中国骨质疏松杂志. 2015(06)



本文编号：3253058