KLD-12多肽/重组人BMP-2凝胶诱导兔BMSCs成骨活性的实验研究
发布时间：2021-07-03 15:45
目的探讨KLD-12多肽复合重组人BMP-2（recombinant human BMP-2,rhBMP-2）诱导兔BMSCs成骨活性的影响。方法取3月龄新西兰大白兔骨髓,采用密度梯度法分离培养BMSCs。取第3代BMSCs分别采用KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶三维培养（实验组）和KLD-12多肽凝胶培养（对照组）。培养7 d倒置相差显微镜下观察实验组细胞在凝胶内的形态;3、7、10、14、21 d检测两组细胞培养基中ALP及骨钙蛋白含量;培养14 d两组行Ⅰ型胶原免疫荧光染色观察,实时荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原和骨钙蛋白基因相对表达量。结果倒置相差显微镜下观察,培养7 d实验组及对照组凝胶内BMSCs呈圆形,分布均匀。两组培养3、7 d时ALP表达量及骨钙蛋白含量比较差异无统计学意义（P>0.05）,1021 d实验组以上指标均明显高于对照组（P<0.05）。培养14 d,激光共聚焦显微镜观察示,实验组Ⅰ型胶原免疫荧光染色阳性,且荧光强度较对照组高;实时荧光定量PCR检测实验组Ⅰ型胶原、骨钙蛋白基因相对表达量均显著高于对照组,比较差异有统计学意...
【文章来源】：中国修复重建外科杂志. 2016,30(12)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
培养7d凝胶内BMSCs观察（倒置相差显微镜×40）
，还有待进一步研究。目前，骨组织工程研究中采用的细胞支架可分为3类，分别为钙磷陶瓷、天然高分子材料、人工合成的高分子多聚物。它们单独使用时均存在不同缺点，如可塑性差、生物降解速度慢、可能引起免疫排斥反应及细胞吸附力差等。KLD-12多肽是由氨基酸构成的多肽结构，其亲水基和疏水基交替排列，紧密结合成坚固的分子结构，被激发的KLD-12多肽自组装后能够紧密结合并维持一定形态，多肽表面具有一定弹性，内部多孔特性能够促进营养物质图1BMSCs形态观察（倒置相差显微镜×10）a原代培养14db第3代细胞图2培养7d凝胶内BMSCs观察（倒置相差显微镜×40）a实验组b对照组图3各时间点两组细胞培养基中ALP表达量图4各时间点两组细胞培养基中骨钙蛋白含量图5培养14dⅠ型胶原免疫荧光染色观察（激光共聚焦显微镜×200）a对照组b实验组Fig.1MorphologicalobservationofBMSCs(Invertedphasecontrastmicroscope×10)aPrimarycellsat14daysbThethirdgenerationcellsFig.2ObservationofBMSCsinthegelat7days(Invertedphasecontrastmicroscope×40)aExperimentalgroupbControlgroupFig.3ALPexpressionincellculturemediumof2groupsatdierenttimepointsFig.4Osteocalcincontentincellculturemediumof2groupsatdierenttimepointsFig.5ObservationofcollagentypeIimmunouorescencestainingat14days(Laserscanningconfocalmicroscope×200)aControlgroupbExperimentalgroup
，还有待进一步研究。目前，骨组织工程研究中采用的细胞支架可分为3类，分别为钙磷陶瓷、天然高分子材料、人工合成的高分子多聚物。它们单独使用时均存在不同缺点，如可塑性差、生物降解速度慢、可能引起免疫排斥反应及细胞吸附力差等。KLD-12多肽是由氨基酸构成的多肽结构，其亲水基和疏水基交替排列，紧密结合成坚固的分子结构，被激发的KLD-12多肽自组装后能够紧密结合并维持一定形态，多肽表面具有一定弹性，内部多孔特性能够促进营养物质图1BMSCs形态观察（倒置相差显微镜×10）a原代培养14db第3代细胞图2培养7d凝胶内BMSCs观察（倒置相差显微镜×40）a实验组b对照组图3各时间点两组细胞培养基中ALP表达量图4各时间点两组细胞培养基中骨钙蛋白含量图5培养14dⅠ型胶原免疫荧光染色观察（激光共聚焦显微镜×200）a对照组b实验组Fig.1MorphologicalobservationofBMSCs(Invertedphasecontrastmicroscope×10)aPrimarycellsat14daysbThethirdgenerationcellsFig.2ObservationofBMSCsinthegelat7days(Invertedphasecontrastmicroscope×40)aExperimentalgroupbControlgroupFig.3ALPexpressionincellculturemediumof2groupsatdierenttimepointsFig.4Osteocalcincontentincellculturemediumof2groupsatdierenttimepointsFig.5ObservationofcollagentypeIimmunouorescencestainingat14days(Laserscanningconfocalmicroscope×200)aControlgroupbExperimentalgroup
本文编号：3262874
【文章来源】：中国修复重建外科杂志. 2016,30(12)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
培养7d凝胶内BMSCs观察（倒置相差显微镜×40）
，还有待进一步研究。目前，骨组织工程研究中采用的细胞支架可分为3类，分别为钙磷陶瓷、天然高分子材料、人工合成的高分子多聚物。它们单独使用时均存在不同缺点，如可塑性差、生物降解速度慢、可能引起免疫排斥反应及细胞吸附力差等。KLD-12多肽是由氨基酸构成的多肽结构，其亲水基和疏水基交替排列，紧密结合成坚固的分子结构，被激发的KLD-12多肽自组装后能够紧密结合并维持一定形态，多肽表面具有一定弹性，内部多孔特性能够促进营养物质图1BMSCs形态观察（倒置相差显微镜×10）a原代培养14db第3代细胞图2培养7d凝胶内BMSCs观察（倒置相差显微镜×40）a实验组b对照组图3各时间点两组细胞培养基中ALP表达量图4各时间点两组细胞培养基中骨钙蛋白含量图5培养14dⅠ型胶原免疫荧光染色观察（激光共聚焦显微镜×200）a对照组b实验组Fig.1MorphologicalobservationofBMSCs(Invertedphasecontrastmicroscope×10)aPrimarycellsat14daysbThethirdgenerationcellsFig.2ObservationofBMSCsinthegelat7days(Invertedphasecontrastmicroscope×40)aExperimentalgroupbControlgroupFig.3ALPexpressionincellculturemediumof2groupsatdierenttimepointsFig.4Osteocalcincontentincellculturemediumof2groupsatdierenttimepointsFig.5ObservationofcollagentypeIimmunouorescencestainingat14days(Laserscanningconfocalmicroscope×200)aControlgroupbExperimentalgroup
，还有待进一步研究。目前，骨组织工程研究中采用的细胞支架可分为3类，分别为钙磷陶瓷、天然高分子材料、人工合成的高分子多聚物。它们单独使用时均存在不同缺点，如可塑性差、生物降解速度慢、可能引起免疫排斥反应及细胞吸附力差等。KLD-12多肽是由氨基酸构成的多肽结构，其亲水基和疏水基交替排列，紧密结合成坚固的分子结构，被激发的KLD-12多肽自组装后能够紧密结合并维持一定形态，多肽表面具有一定弹性，内部多孔特性能够促进营养物质图1BMSCs形态观察（倒置相差显微镜×10）a原代培养14db第3代细胞图2培养7d凝胶内BMSCs观察（倒置相差显微镜×40）a实验组b对照组图3各时间点两组细胞培养基中ALP表达量图4各时间点两组细胞培养基中骨钙蛋白含量图5培养14dⅠ型胶原免疫荧光染色观察（激光共聚焦显微镜×200）a对照组b实验组Fig.1MorphologicalobservationofBMSCs(Invertedphasecontrastmicroscope×10)aPrimarycellsat14daysbThethirdgenerationcellsFig.2ObservationofBMSCsinthegelat7days(Invertedphasecontrastmicroscope×40)aExperimentalgroupbControlgroupFig.3ALPexpressionincellculturemediumof2groupsatdierenttimepointsFig.4Osteocalcincontentincellculturemediumof2groupsatdierenttimepointsFig.5ObservationofcollagentypeIimmunouorescencestainingat14days(Laserscanningconfocalmicroscope×200)aControlgroupbExperimentalgroup
本文编号：3262874
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