高压氧联合督脉电针对脊髓损伤大鼠Nogo-A及NgR受体的影响
发布时间：2021-08-23 15:48
目的:本课题旨在研究高压氧联合电针对脊髓损伤大鼠髓鞘相关抑制蛋白（Nogo-A及NgR受体）的影响。方法:将84只雌性SD大鼠随机分为4组,依次为模型组、高压氧治疗组电针治疗组及联合治疗组。采用Allen′s打击法打击大鼠,实验重物5g,高度为4cm。造模成功后,模型组不进行干预,高压氧治疗组治疗压力为2.0ATA,用纯氧洗舱10min,再减压15min出舱,总治疗时间85min,每日1次;电针治疗组选取大鼠大椎、命门、腰阳关和长强穴各刺入5mm达硬模外,采用华佗牌SDZ-2型电针治疗仪,疏密波,以2Hz频率,强度适中,以针刺处肌肉轻微抖动,适应后双下肢瘫痪肌肉出现有节律性收缩为宜,治疗时间为20min;联合治疗组治疗方法为联合高压氧和电针治疗。分别在损伤3d、7d、14d进行取材,对损伤区域进行脊髓BBB运动功能评分、HE染色及RT-qPCR法进行Nogo-A、NgR mRNA基因检测。结果:损伤后3、7和14d联合治疗组、高压氧治疗组和电针治疗组BBB评分均高于模型组,认为有统计学意义（P<0.001）,且联合治疗组评分均高于高压氧治疗组与电针治疗组（P<0.001）,...
【文章来源】：福建中医药大学福建省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组 BBB 评分趋势,图中显示出联合治疗组在 3、7 和 14d BBB 评分均呈上升趋势 且均高于其余三组,高压氧治疗组和电针治疗组运动功能评分呈上升趋势,两组评分曲线基 本重合,无明显差异。模型组评分趋势升高,但不同时间段均未高于其余三组。
在光学显微镜下可以看到:正常神经细胞(如图3-2)细胞质和细胞核清晰可见,细胞完整,细胞间的连接无异常,无细胞损伤出血,无炎症细胞浸润。而模型组(如图3-3)背景均损伤出血,细胞肿胀,周围有炎症渗出,部分出血坏死,炎性细胞大量聚集,部分胶质细胞坏死溶解,周围神经由于缺血、缺氧,核皱缩,形成空泡状(周围裂隙增宽)。经高压氧和电针治疗后:损伤部位胶质细胞反应性增生,炎症细胞减少,周围神经元细胞缺血缺氧减轻,凋亡减少。皱缩的神经元细胞经治疗后反应性的恢复,核质变得清晰,还可以较清楚地看到神经元细胞从皱缩到恢复的痕迹(箭头所示)。随着损伤时间的推移,治疗组胶质纤维增生,神经细胞得到明显改善;而模型组细胞瓦解,形成空泡,胶质纤维少量增生,神经损伤修复不明显。3.3 RT-qPCR检测Nogo-A及 NgR的基因表达量
经RT-qPCR方法测出CT值,采用2-??ct值法计算出Nogo-A基因的表达浓度后,符合正态分布,经单因素方差分析和LSD-t检验后得出各组与模型组相比较的基因表达浓度的均值、F值及P值(如表3-2),并建立了各组不同时间表达浓度柱状图(组间比较图3-4、组内比较图3-5)。可以得出,在损伤后3、7和14d,高压氧组、电针组和联合组的Nogo-A mRNA表达量均低于模型组,有统计学意义(P<0.05)。并且联合治疗组Nogo-A mRNA表达量低于高压氧治疗组和电针治疗组,高压氧治疗组与电针治疗组相比较无明显意义。此外,同组内不同时间比较,无论是损伤3、7还是14d,同组Nogo-A mRNA表达量无明显变化,无统计学意义(P>0.05)。在RT-qPCR仪器中,检测NgR在脊髓损伤3天前的表达量也极少(CT值均在35以上)或无法显示,所以采用2-??ct值法计算出Nogo-A基因的表达浓度的均值(表3-3),由于原数据不符合正态分布经对数转换后采用单因素方差分析和LSD-t检验统计后得出各组与模型组表达浓度相比较的均值、F值及P值(表3-4),并建立相应柱状图(如图3-6和图3-7)。在损伤后7d高压氧治疗组与、电针治疗组和联合治疗组NgR mRNA表达量与模型组比,F值为8.52,P<0.05,所以电针治疗组和联合治疗组NgR mRNA表达量均低于模型组,有统计学意义。并且联合治疗组NgR mRNA表达量低于高压氧治疗组和电针治疗组,高压氧治疗组与电针治疗组相比无明显差异。另外,各组内比较采用独立样本t检验统计出无论是治疗7d还是14d,各组内NgR mRNA的表达量变化不大,无统计学意义(P>0.05)。图3-5各组内Nogo-a mRNA表达趋势,图中柱形图黑色代表模型组、深灰色代表电针治疗组、灰色代表高压氧治疗组,浅灰色代表联合治疗组。各组从左往右分别为损伤后3、7和14d的Nogo-a mRNA表达量,各组间不同时间段柱状图高度无明显差异。
【参考文献】：
期刊论文
[1]电针脊髓损伤模型大鼠“足三里”与“伏兔”穴神经细胞凋亡因子Caspase-3的表达[J]. 魏卫兵,周宾宾,张鸿升,杨宇,崔俊武,李振兴. 中国组织工程研究. 2020(32)
[2]电针“夹脊”穴对急性脊髓损伤大鼠少突胶质前体细胞增殖分化的影响[J]. 胡蓉,陈怡,徐海鹏,何克林,孙连珠,吴磊,马睿杰. 中国针灸. 2020(05)
[3]电针刺激脊髓损伤大鼠足阳明胃经脊髓受损节段Bax、Bcl-2的mRNA和蛋白的表达[J]. 吴凡,许权,周宾宾,魏卫兵,王珠,严潮浪. 中国组织工程研究. 2020(26)
[4]脊髓损伤患者行高压氧结合传统康复治疗的效果观察[J]. 黄俊杰,齐珊珊,侯铁东. 中国实用医药. 2020(03)
[5]督脉电针对脊髓损伤后MAPK/ERK/1/2信号通路的影响[J]. 卫哲,祝力骋. 中华物理医学与康复杂志. 2020(01)
[6]夹脊电针对急性脊髓损伤大鼠脊髓病理形态及组织中炎性因子表达的影响[J]. 付豪,梅继林,李庆琳,李晓宁. 针灸临床杂志. 2020(01)
[7]夹脊电针干预对大鼠脊髓损伤区巨噬细胞NgR表达的影响[J]. 杜晓伟,滕秀英,高长乐,何旭,张如月. 中国中医药科技. 2020(01)
[8]督脉电针及家庭跟进式护理对脊柱骨折合并脊髓损伤术后患者FIB、CRP的影响[J]. 黄月秋,卢雪华,黄东挺. 现代医学与健康研究电子杂志. 2020(01)
[9]电针干预脊髓损伤大鼠受损节段缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子的表达[J]. 张鸿升,魏卫兵,周宾宾,崔俊武,李振兴,王永清. 中国组织工程研究. 2020(11)
[10]高压氧综合治疗对脊髓损伤患者神经功能恢复的影响及其作用机制[J]. 杜亮,侯宁. 中华航海医学与高气压医学杂志. 2019(06)
博士论文
[1]高压氧和低压缺氧预处理对大鼠脊髓损伤神经保护作用及机制的实验研究[D]. 卢培刚.第三军医大学 2008
硕士论文
[1]高压氧疗法治疗脊髓损伤患者有效性的Meta分析[D]. 陈奇.吉林大学 2019
[2]线粒体GTPase相关通路调控下高压氧对脊髓损伤大鼠神经保护的机制研究[D]. 王志威.广东药科大学 2017
本文编号：3358156
【文章来源】：福建中医药大学福建省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组 BBB 评分趋势,图中显示出联合治疗组在 3、7 和 14d BBB 评分均呈上升趋势 且均高于其余三组,高压氧治疗组和电针治疗组运动功能评分呈上升趋势,两组评分曲线基 本重合,无明显差异。模型组评分趋势升高,但不同时间段均未高于其余三组。
在光学显微镜下可以看到:正常神经细胞(如图3-2)细胞质和细胞核清晰可见,细胞完整,细胞间的连接无异常,无细胞损伤出血,无炎症细胞浸润。而模型组(如图3-3)背景均损伤出血,细胞肿胀,周围有炎症渗出,部分出血坏死,炎性细胞大量聚集,部分胶质细胞坏死溶解,周围神经由于缺血、缺氧,核皱缩,形成空泡状(周围裂隙增宽)。经高压氧和电针治疗后:损伤部位胶质细胞反应性增生,炎症细胞减少,周围神经元细胞缺血缺氧减轻,凋亡减少。皱缩的神经元细胞经治疗后反应性的恢复,核质变得清晰,还可以较清楚地看到神经元细胞从皱缩到恢复的痕迹(箭头所示)。随着损伤时间的推移,治疗组胶质纤维增生,神经细胞得到明显改善;而模型组细胞瓦解,形成空泡,胶质纤维少量增生,神经损伤修复不明显。3.3 RT-qPCR检测Nogo-A及 NgR的基因表达量
经RT-qPCR方法测出CT值,采用2-??ct值法计算出Nogo-A基因的表达浓度后,符合正态分布,经单因素方差分析和LSD-t检验后得出各组与模型组相比较的基因表达浓度的均值、F值及P值(如表3-2),并建立了各组不同时间表达浓度柱状图(组间比较图3-4、组内比较图3-5)。可以得出,在损伤后3、7和14d,高压氧组、电针组和联合组的Nogo-A mRNA表达量均低于模型组,有统计学意义(P<0.05)。并且联合治疗组Nogo-A mRNA表达量低于高压氧治疗组和电针治疗组,高压氧治疗组与电针治疗组相比较无明显意义。此外,同组内不同时间比较,无论是损伤3、7还是14d,同组Nogo-A mRNA表达量无明显变化,无统计学意义(P>0.05)。在RT-qPCR仪器中,检测NgR在脊髓损伤3天前的表达量也极少(CT值均在35以上)或无法显示,所以采用2-??ct值法计算出Nogo-A基因的表达浓度的均值(表3-3),由于原数据不符合正态分布经对数转换后采用单因素方差分析和LSD-t检验统计后得出各组与模型组表达浓度相比较的均值、F值及P值(表3-4),并建立相应柱状图(如图3-6和图3-7)。在损伤后7d高压氧治疗组与、电针治疗组和联合治疗组NgR mRNA表达量与模型组比,F值为8.52,P<0.05,所以电针治疗组和联合治疗组NgR mRNA表达量均低于模型组,有统计学意义。并且联合治疗组NgR mRNA表达量低于高压氧治疗组和电针治疗组,高压氧治疗组与电针治疗组相比无明显差异。另外,各组内比较采用独立样本t检验统计出无论是治疗7d还是14d,各组内NgR mRNA的表达量变化不大,无统计学意义(P>0.05)。图3-5各组内Nogo-a mRNA表达趋势,图中柱形图黑色代表模型组、深灰色代表电针治疗组、灰色代表高压氧治疗组,浅灰色代表联合治疗组。各组从左往右分别为损伤后3、7和14d的Nogo-a mRNA表达量,各组间不同时间段柱状图高度无明显差异。
【参考文献】：
期刊论文
[1]电针脊髓损伤模型大鼠“足三里”与“伏兔”穴神经细胞凋亡因子Caspase-3的表达[J]. 魏卫兵,周宾宾,张鸿升,杨宇,崔俊武,李振兴. 中国组织工程研究. 2020(32)
[2]电针“夹脊”穴对急性脊髓损伤大鼠少突胶质前体细胞增殖分化的影响[J]. 胡蓉,陈怡,徐海鹏,何克林,孙连珠,吴磊,马睿杰. 中国针灸. 2020(05)
[3]电针刺激脊髓损伤大鼠足阳明胃经脊髓受损节段Bax、Bcl-2的mRNA和蛋白的表达[J]. 吴凡,许权,周宾宾,魏卫兵,王珠,严潮浪. 中国组织工程研究. 2020(26)
[4]脊髓损伤患者行高压氧结合传统康复治疗的效果观察[J]. 黄俊杰,齐珊珊,侯铁东. 中国实用医药. 2020(03)
[5]督脉电针对脊髓损伤后MAPK/ERK/1/2信号通路的影响[J]. 卫哲,祝力骋. 中华物理医学与康复杂志. 2020(01)
[6]夹脊电针对急性脊髓损伤大鼠脊髓病理形态及组织中炎性因子表达的影响[J]. 付豪,梅继林,李庆琳,李晓宁. 针灸临床杂志. 2020(01)
[7]夹脊电针干预对大鼠脊髓损伤区巨噬细胞NgR表达的影响[J]. 杜晓伟,滕秀英,高长乐,何旭,张如月. 中国中医药科技. 2020(01)
[8]督脉电针及家庭跟进式护理对脊柱骨折合并脊髓损伤术后患者FIB、CRP的影响[J]. 黄月秋,卢雪华,黄东挺. 现代医学与健康研究电子杂志. 2020(01)
[9]电针干预脊髓损伤大鼠受损节段缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子的表达[J]. 张鸿升,魏卫兵,周宾宾,崔俊武,李振兴,王永清. 中国组织工程研究. 2020(11)
[10]高压氧综合治疗对脊髓损伤患者神经功能恢复的影响及其作用机制[J]. 杜亮,侯宁. 中华航海医学与高气压医学杂志. 2019(06)
博士论文
[1]高压氧和低压缺氧预处理对大鼠脊髓损伤神经保护作用及机制的实验研究[D]. 卢培刚.第三军医大学 2008
硕士论文
[1]高压氧疗法治疗脊髓损伤患者有效性的Meta分析[D]. 陈奇.吉林大学 2019
[2]线粒体GTPase相关通路调控下高压氧对脊髓损伤大鼠神经保护的机制研究[D]. 王志威.广东药科大学 2017
本文编号：3358156
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