Tau蛋白的过磷酸化修饰在臂丛神经损伤后神经元逆行性退变中的研究
发布时间：2021-08-30 21:45
目的:臂丛神经根性撕脱伤是一种严重的外周神经损伤,会造成上肢功能的严重受损,健侧颈7移位术为患者带来了希望,为了进一步提高手术疗效,需要攻克的一个难题是切断颈7神经后造成的脊髓中枢神经元的逆行性退变（Neuronal Retrograde Degeneration,NRD）。在众多中枢神经系统退变的疾病中,均有Tau蛋白的异常磷酸化发生,而外周神经损伤后的中枢神经逆行性退变的发生过程中是否有Tau蛋白的过度磷酸化尚未报道。本文旨在研究Tau蛋白的过磷酸化修饰在该退变中的变化。方法:构造SD大鼠颈7神经切断的模型,饲养至2周、4周、6周及8周后取大鼠颈7节段的脊髓组织,通过HE染色,流式细胞学,Western Blot,免疫组化来分析神经细胞的凋亡情况及Tau蛋白的磷酸化水平;给予氯化锂药物试图阻断神经元凋亡的中间过程,相同的方法分析干预后的神经细胞的凋亡情况及Tau蛋白的磷酸化水平,比较差异。结果:HE染色及流式细胞学检测显示2周时的细胞凋亡程度小于4周时的凋亡程度;Western Blot及免疫组化结果提示随着周数的增加,总Tau蛋白的量因颈7神经的切断而下降,磷酸化的Tau蛋白的量...
【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．?２周时切断双侧臂丛颈７神经后的大鼠Ｃ７节段脊髓组织的神经元细胞的形??态变化
结果?Ｔａｕ蛋白的过磷酸化修饰在臂丛神经损伤后神经元逆行性退变中的研究??星号表示萎缩退变的神经元细胞。??在４周时，假手术组的切片与２周时的组织无明显病理学变化，神经元细胞的胞??体与突起之间联系紧密；切断组的脊髓中枢神经元细胞发生了同２周切断组相似的明??显退变，与２周切断组组织有差别的是，４周切断组切片内的萎缩神经元细胞周围的??空泡化比率及空泡范围都较前者小，周围的胶质瘢痕化程度高，组织结构排列紊乱，??局限性致密度增高；氯化锂药物干预组的颈髓组织的退变程度较假手术组重，但比切??断组轻，组织细胞分布特点同２周干预组，但细胞分布密度较２周干预组低（图２）。??藝＿?＿??瞧??＇■二．入，…：??干预组??干预??１００Ｘ?４００?Ｘ??图２．?４周时切断双侧臂丛颈７神经后的大鼠Ｃ７节段脊髓组织的神经元细胞的形??态变化。在放大倍数为４００ｘ的图像中，红色箭头表示正常形态的神经元细胞，红色??星号表示萎缩退变的神经元细胞。??总结２周及４周的ＨＥ染色结果，两批次的假手术组的颈髓神经元细胞均无明显??的自发性退变情况发生，为正常生理状态下的生长发育过程，能够在实验中起到良好??的参照作用。两批次的切断双侧颈７神经组，大鼠的颈髓组织均发生了形态学上可见??的神经元细胞退变，证明切断周围神经后会发生中枢神经元的逆行性退变；４周组的??胶质细胞增生替代原生神经元细胞退变后的组织架构的现象在２周组的颈髓组织内??表现不明显，既与退变的严重程度有关，也与生理上发生胶质瘢痕化过程的时间有关。??两批次的双侧颈７神经切断组大鼠在经氯化锂药物干预后，颈髓组织的退变程度都较??１２??
组的神经元退变程度发生了好转，但相对假手术组而言并没有发生退变的停??滞，即氯化锂能够改善退变程度，但不能逆转退变的方向，且随着时间的推移，退变??程度亦逐渐增加。??２．流式细胞学结果??在对颈髓内中枢神经元细胞的退变研宄中，我们使用流式细胞学检测来分析大鼠??臂丛颈７神经切断术后的脊髓神经元细胞的凋亡量。结果显示：２周时，假手术组的??组织细胞凋亡率为５．４５±０．２８％，切断组的组织细胞凋亡率为１０．７６±０．２３％，干预组的??组织细胞凋亡率为６．５８±０．２６％?（表１，图３）。???表１．各组大鼠２周时Ｃ７脊髓神经细胞凋亡情况（％，Ｍｅａｎ土ＳＤ）??ｍ＼?Ｍ?Ｃ７脊髓神经细胞凋亡占比??假手术组?６?５．４５士?０．２８??切断组?６?１０．７６±０．２３?＊??干预组?６?６．５８±０．２６?＃??注：与假手术组比较，＊?Ｐ＜〇．?〇５；与切断组比较，＃?Ｐ＜〇．?０５??Ｋ００２．Ｐ１?ＴｕｔｗＪ３Ｗ．Ｐｌ?了叙．．》５，??ＶＬ?｜?ｉｍ?Ｕｔ?ＵＲ?ＵＬ?ＵＲ??Ｉ?９．９９?ｒｆｂ．３４?０．１７?卿?Ｂ?０．１４??ｉｔ?１?次??１＇＾ｉ??ｔｋ?Ａ?，｜?Ａ?Ｉ??：隊―麵厂―??９４．４６?＞１６?ｊ?ｔｄ．ｍ?ｗｉｎ?６．？ｓ??＾?＾?＾?－ｉ＊?Ｗ?Ｗ?ｍ?＾??獅?ｒ?ｔｃ?－ａ?ｎｔｃ－Ａ?Ｆｉｒｅ－－ａ??ＡＢＣ??图３．２周时大鼠Ｃ７节段脊髓组织内细胞的凋亡率。（Ａ）假手术组；（Ｂ）切断??组；（Ｃ）干预组。??４周时，假手术组的组织细胞凋亡率为５．３９±０．２８％，切断组的组织
【参考文献】：
期刊论文
[1]利多卡因对运动及感觉神经元保护作用的实验研究[J]. 糜菁熠,徐建光,徐文东,林森,李继峰. 中华手外科杂志. 2004(04)
本文编号：3373551
【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．?２周时切断双侧臂丛颈７神经后的大鼠Ｃ７节段脊髓组织的神经元细胞的形??态变化
结果?Ｔａｕ蛋白的过磷酸化修饰在臂丛神经损伤后神经元逆行性退变中的研究??星号表示萎缩退变的神经元细胞。??在４周时，假手术组的切片与２周时的组织无明显病理学变化，神经元细胞的胞??体与突起之间联系紧密；切断组的脊髓中枢神经元细胞发生了同２周切断组相似的明??显退变，与２周切断组组织有差别的是，４周切断组切片内的萎缩神经元细胞周围的??空泡化比率及空泡范围都较前者小，周围的胶质瘢痕化程度高，组织结构排列紊乱，??局限性致密度增高；氯化锂药物干预组的颈髓组织的退变程度较假手术组重，但比切??断组轻，组织细胞分布特点同２周干预组，但细胞分布密度较２周干预组低（图２）。??藝＿?＿??瞧??＇■二．入，…：??干预组??干预??１００Ｘ?４００?Ｘ??图２．?４周时切断双侧臂丛颈７神经后的大鼠Ｃ７节段脊髓组织的神经元细胞的形??态变化。在放大倍数为４００ｘ的图像中，红色箭头表示正常形态的神经元细胞，红色??星号表示萎缩退变的神经元细胞。??总结２周及４周的ＨＥ染色结果，两批次的假手术组的颈髓神经元细胞均无明显??的自发性退变情况发生，为正常生理状态下的生长发育过程，能够在实验中起到良好??的参照作用。两批次的切断双侧颈７神经组，大鼠的颈髓组织均发生了形态学上可见??的神经元细胞退变，证明切断周围神经后会发生中枢神经元的逆行性退变；４周组的??胶质细胞增生替代原生神经元细胞退变后的组织架构的现象在２周组的颈髓组织内??表现不明显，既与退变的严重程度有关，也与生理上发生胶质瘢痕化过程的时间有关。??两批次的双侧颈７神经切断组大鼠在经氯化锂药物干预后，颈髓组织的退变程度都较??１２??
组的神经元退变程度发生了好转，但相对假手术组而言并没有发生退变的停??滞，即氯化锂能够改善退变程度，但不能逆转退变的方向，且随着时间的推移，退变??程度亦逐渐增加。??２．流式细胞学结果??在对颈髓内中枢神经元细胞的退变研宄中，我们使用流式细胞学检测来分析大鼠??臂丛颈７神经切断术后的脊髓神经元细胞的凋亡量。结果显示：２周时，假手术组的??组织细胞凋亡率为５．４５±０．２８％，切断组的组织细胞凋亡率为１０．７６±０．２３％，干预组的??组织细胞凋亡率为６．５８±０．２６％?（表１，图３）。???表１．各组大鼠２周时Ｃ７脊髓神经细胞凋亡情况（％，Ｍｅａｎ土ＳＤ）??ｍ＼?Ｍ?Ｃ７脊髓神经细胞凋亡占比??假手术组?６?５．４５士?０．２８??切断组?６?１０．７６±０．２３?＊??干预组?６?６．５８±０．２６?＃??注：与假手术组比较，＊?Ｐ＜〇．?〇５；与切断组比较，＃?Ｐ＜〇．?０５??Ｋ００２．Ｐ１?ＴｕｔｗＪ３Ｗ．Ｐｌ?了叙．．》５，??ＶＬ?｜?ｉｍ?Ｕｔ?ＵＲ?ＵＬ?ＵＲ??Ｉ?９．９９?ｒｆｂ．３４?０．１７?卿?Ｂ?０．１４??ｉｔ?１?次??１＇＾ｉ??ｔｋ?Ａ?，｜?Ａ?Ｉ??：隊―麵厂―??９４．４６?＞１６?ｊ?ｔｄ．ｍ?ｗｉｎ?６．？ｓ??＾?＾?＾?－ｉ＊?Ｗ?Ｗ?ｍ?＾??獅?ｒ?ｔｃ?－ａ?ｎｔｃ－Ａ?Ｆｉｒｅ－－ａ??ＡＢＣ??图３．２周时大鼠Ｃ７节段脊髓组织内细胞的凋亡率。（Ａ）假手术组；（Ｂ）切断??组；（Ｃ）干预组。??４周时，假手术组的组织细胞凋亡率为５．３９±０．２８％，切断组的组织
【参考文献】：
期刊论文
[1]利多卡因对运动及感觉神经元保护作用的实验研究[J]. 糜菁熠,徐建光,徐文东,林森,李继峰. 中华手外科杂志. 2004(04)
本文编号：3373551
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