国产多孔钽对体外诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响

发布时间：2021-10-24 14:48

　　目的 研究TGF-β1和IGF-1对国产多孔钽复合SD大鼠BMSCs向软骨细胞诱导,观察多孔钽-BMSCs复合物细胞分泌功能及对软骨相关因子COL-II、AGG和COL-X表达影响,从而探讨国产多孔钽复合BMSCs后对软骨损伤修复的影响,以期为临床软骨修复提供理论与实验依据。方法 1肉眼及扫描电镜观察国产多孔钽支架材料的形态特征。2 SD大鼠BMSCs的获取、培养、纯化。3 BMSCs鉴定:取第3代BMSCs,进行成骨细胞、成软骨细胞、成脂细胞诱导14天,分别行茜素红、Alcian blue、油红O染色。4国产多孔钽与第3代BMSCs共培养,CCK-8测定BMSCs不同时间点细胞的增殖。5第3代BMSCs与多孔钽共培养,成软骨诱导SEM和TEM观察细胞生长情况。6实验分组:TGF-β1+BMSCs组（A组）、TGF-β1+BMSCs+多孔钽组（B组）、TGF-β1+IGF-1+BMSCs组（C组）、TGF-β1+IGF-1+BMSCs+多孔钽组（D组）。7各组成软骨诱导7、14、21天行ELISA检测国产多孔钽支架复合BMSCs后细胞分泌COL-II、AGG、COL-X功能的影响。8各... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

国产多孔钽支架的形态结构

未贴壁的红细胞、BMSCs 和造血干细胞被去除，贴壁的细胞散在分布，呈纺锤形、三角形和不规则形（图2B），死细胞较多。4~6d 贴壁细胞增加，形成大小不等的细胞集落，集落间相互连接、融合，大部分细胞伸出伪足，呈多角形，死细胞较前减少（图 2C）。7~9d细胞生长旺盛，细胞呈漩涡状密集生长，排列有一定方向性（图 2D，图 2E），第10d 铺满瓶底 80~90%（图 2F）。A B CFDE

A：第 1d；B：第 3d；C：第 5d；D：第 7d；E：第 9d；F：第 10d图 2 倒置相差显微镜观察原代 BMSCs（×100）Fig.2 Primary BMSCS was observed by inverted phase contrast microscope (×100)1.2.3 SD 大鼠 BMSCs 传代培养传代后的 BMSCs 生长迅速，3~5d 即可传代一次。传代后细胞均匀分布，大1h 后开始贴壁，呈长梭形，成纤维细胞样，体积较原代大，漩涡状密集生长，见少量死细胞（图 3）。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3455470