HO-1转染BM MSCs保护减体积肝移植：通过ERK/mTOR途径调节自噬发挥作用
发布时间：2022-01-05 14:53
目的:血红素加氧酶-1（heme oxygenase,HO-1）基因修饰的骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BM MSCs）可以通过参与调节移植免疫和修复损伤组织来保护移植肝脏,其具体机制尚不明确。自噬是真核细胞生物依赖溶酶体途径降解受损细胞器、蛋白质及不被利用生物大分子的一种高度保守的生物学过程。本实验通过建立大鼠50%减体积肝移植（reduced-size liver transplantation,RSLT）排斥反应模型,研究载有HO-1基因的腺病毒转染BM MSCs（HO-1/BM MSCs）对减体积移植肝脏的保护作用的机制,探讨自噬是否参与及其可能的信号通路。方法:本研究首先提取BM MSCs,将携带目的基因HO-1的腺病毒转染BM MSCs,并制备HO-1/BM MSCs,同时制备大鼠50%减体积肝移植排斥反应模型,将实验分为三组:BM MSCs组、HO-1/BM MSCs组和生理盐水（normal saline,NS）组。移植术后即刻分别为阴茎背静脉注射等量的BM MSCs、HO-1/BM MSCs和NS,并分别于移植...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
BMMSCs的细胞形态（100×）
图 1.2 BM MSCs 的细胞表面表型注：A：CD29 阳性/CD34 阴性比例为 98.3 %；B：CD90 阳性/CD45 阴性比例为97.6 %；C：RT1A 阳性/RT1B 阴性比例为 92.3 %1.2.3 BM MSCs 的体外成脂成骨诱导分化能力我们分离提取的 BM MSCs 在成脂和成骨诱导培养液中分别分化为脂肪细胞和成骨细胞。脂肪细胞油红 O 染液染色，显微镜下观察到胞浆内出现橘红脂滴（图 1.3A）；成骨细胞 Von Kossa 染色试剂盒染色，显微镜下观察到黑色钙盐颗粒沉积（图 1.3 B）。
图 1.2 BM MSCs 的细胞表面表型注：A：CD29 阳性/CD34 阴性比例为 98.3 %；B：CD90 阳性/CD45 阴性比例为97.6 %；C：RT1A 阳性/RT1B 阴性比例为 92.3 %1.2.3 BM MSCs 的体外成脂成骨诱导分化能力我们分离提取的 BM MSCs 在成脂和成骨诱导培养液中分别分化为脂肪细胞和成骨细胞。脂肪细胞油红 O 染液染色，显微镜下观察到胞浆内出现橘红脂滴（图 1.3A）；成骨细胞 Von Kossa 染色试剂盒染色，显微镜下观察到黑色钙盐颗粒沉积（图 1.3 B）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Heme oxygenase-1 protects rat liver against warm ischemia/reperfusion injury via TLR2/TLR4-triggered signaling pathways[J]. Han-Fei Huang,Zhong Zeng,Kun-Hua Wang,Hai-Yan Zhang,Shuai Wang,Wen-Xiang Zhou,Zhan-Bo Wang,Wang-Gang Xu,Jian Duan. World Journal of Gastroenterology. 2015(10)
[2]N-acetylcysteine attenuates reactive-oxygen-speciesmediated endoplasmic reticulum stress during liver ischemia-reperfusion injury[J]. Yong Sun,Li-Yong Pu,Ling Lu,Xue-Hao Wang,Feng Zhang,,Jian-Hua Rao. World Journal of Gastroenterology. 2014(41)
[3]不同品系大鼠之间肝移植排斥反应的比较研究[J]. 叶志坚,杨中萌,王效民. 器官移植. 2014(05)
本文编号：3570553
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
BMMSCs的细胞形态（100×）
图 1.2 BM MSCs 的细胞表面表型注：A：CD29 阳性/CD34 阴性比例为 98.3 %；B：CD90 阳性/CD45 阴性比例为97.6 %；C：RT1A 阳性/RT1B 阴性比例为 92.3 %1.2.3 BM MSCs 的体外成脂成骨诱导分化能力我们分离提取的 BM MSCs 在成脂和成骨诱导培养液中分别分化为脂肪细胞和成骨细胞。脂肪细胞油红 O 染液染色，显微镜下观察到胞浆内出现橘红脂滴（图 1.3A）；成骨细胞 Von Kossa 染色试剂盒染色，显微镜下观察到黑色钙盐颗粒沉积（图 1.3 B）。
图 1.2 BM MSCs 的细胞表面表型注：A：CD29 阳性/CD34 阴性比例为 98.3 %；B：CD90 阳性/CD45 阴性比例为97.6 %；C：RT1A 阳性/RT1B 阴性比例为 92.3 %1.2.3 BM MSCs 的体外成脂成骨诱导分化能力我们分离提取的 BM MSCs 在成脂和成骨诱导培养液中分别分化为脂肪细胞和成骨细胞。脂肪细胞油红 O 染液染色，显微镜下观察到胞浆内出现橘红脂滴（图 1.3A）；成骨细胞 Von Kossa 染色试剂盒染色，显微镜下观察到黑色钙盐颗粒沉积（图 1.3 B）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Heme oxygenase-1 protects rat liver against warm ischemia/reperfusion injury via TLR2/TLR4-triggered signaling pathways[J]. Han-Fei Huang,Zhong Zeng,Kun-Hua Wang,Hai-Yan Zhang,Shuai Wang,Wen-Xiang Zhou,Zhan-Bo Wang,Wang-Gang Xu,Jian Duan. World Journal of Gastroenterology. 2015(10)
[2]N-acetylcysteine attenuates reactive-oxygen-speciesmediated endoplasmic reticulum stress during liver ischemia-reperfusion injury[J]. Yong Sun,Li-Yong Pu,Ling Lu,Xue-Hao Wang,Feng Zhang,,Jian-Hua Rao. World Journal of Gastroenterology. 2014(41)
[3]不同品系大鼠之间肝移植排斥反应的比较研究[J]. 叶志坚,杨中萌,王效民. 器官移植. 2014(05)
本文编号：3570553
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/waikelunwen/3570553.html
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