脂肪间充质干细胞对皮肤移植成活过程的影响

发布时间：2017-08-21 17:23

  本文关键词：脂肪间充质干细胞对皮肤移植成活过程的影响

  更多相关文章： 脂肪间充质干细胞 皮肤移植 血管化 抑制炎症 巨噬细胞 胶原沉积

【摘要】：目的本文旨在从促进血管化、抑制炎症及促进胶原形成等方面分析探讨脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells, ASCs)对皮肤移植成活过程的影响。方法取30只SD大鼠,随机分为实验组ASC组及对照组PBS组,每组各15只大鼠。于背部中央各取3cm×3cm全层皮肤及其肉膜组织,ASCs经过分离、提取及鉴定后分别注射于ASC组大鼠背部筋膜层,对照组对应注射PBS后,将游离皮片回植,打包加压固定。分别与第1、2、3、7及14天通过激光多普勒仪进行评估皮肤成活情况及血流灌注情况,并取材行相关组织学及分子生物学检查。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)免疫组织化学检测皮片血管生成情况;同时对14天的组织行血管性血友病因子(von Willebrand Factor, vWF)免疫荧光检测，进一步了解CM-Dil标记的ASCs的转归。马松及天狼猩红染色观察胶原形成情况,免疫组织化学染色抑制瘢痕形成因子转化生长因子β3 (transforming growth factorβ3, TGF-β3)的表达。通过实时定量PCR检测炎症相关的细胞因子的表达,并通过免疫荧光以及western blot检测巨噬细胞亚型的分布。结果ASC组皮肤移植后血流灌注明显高于对照组,14天后,ASCs组新血管形成,胶原沉积,胶原蛋白I型与III型比和VEGF水平和TGFβ3表达高于PBS组。此外,ASC组促进炎症因子IL-1β和TNF-a表达显著减少,而抗炎因子IL-10的水平和M2型巨噬细胞标志物Arg-1等表达增加。结论ASCs通过促进促进血管化、抑制炎症及促进胶原沉积，，可以有效增加皮肤移植后血流灌注,促进血运建立,改善皮移植的成活。另外,本研究探索了ASCs的抗炎效应,并了解到ASCs通过调节巨噬细胞的表型,增加M2型巨噬细胞的表达来实现其抗炎作用,从而间接促进了皮肤移植的成活。
【关键词】：脂肪间充质干细胞 皮肤移植 血管化 抑制炎症 巨噬细胞 胶原沉积
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R622.1
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 第一部分 ASCs的分离提取与鉴定11-20
• 实验材料11-13
• 实验方法13-16
• 实验结果16-19
• 讨论19-20
• 第二部分 ASCs对大鼠皮片移植成活过程的影响20-43
• 实验材料20-22
• 实验方法22-33
• 实验结果33-41
• 讨论41-43
• 结论43-44
• 参考文献44-48
• 文献综述48-58
• 参考文献53-58
• 个人简历58
• 硕士期间发表文章58-59
• 致谢59

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