野百合碱致肺动脉高压中细胞自噬分子的表达和功能

发布时间：2017-10-10 07:08

  本文关键词：野百合碱致肺动脉高压中细胞自噬分子的表达和功能

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【摘要】：目的:观察细胞自噬相关蛋白在肺动脉高压发病过程中的动态变化,探讨细胞自噬在肺动脉高压发病中的可能作用。方法:建立野百合碱肺动脉高压动物模型:SD大鼠以2%MCT按60mg/kg剂量一次性腹腔注射,正常饲养3wk。并测定下列指标:①右心室收缩压(RVSP);②HE染色观察肺动脉血管形态;③用实时定量PCR的方法检测细胞自噬标志性基因LC3和p62的m RNA在模型组的动态表达;④分别用免疫组织化学和Western blot方法测定细胞自噬相关蛋白LC3和p62在肺动脉高压模型组织中的动态变化.。结果:与正常对照组(CON组)相比,①模型组(MCT组)的RVSP随着时间的延长而逐渐增高(P0.05),证明PAH模型建造成功;②HE染色见肺动脉平滑肌出现不同程度的增生,管壁厚度增加,管腔逐渐狭窄并伴有不同程度的损伤甚至断裂;肺血管损伤明显,内皮细胞变性肿胀,突向血管腔内,甚至坏死脱落;③MCT组LC3的m RNA表达相比对照组呈递增趋势,而p62的m RNA表达则随时间延长而下降;④不同时间点模型组LC3的平均灰度值均明显升高,p62的平均灰度值均下降;模型组的LC3蛋白过表达,而p62蛋白呈现低表达。结论:野百合碱可以成功诱导出SD大鼠肺动脉高压模型;自噬相关因子LC3,p62在PAH发病中的动态表达提示自噬可能参与了PAH的发病过程。
【关键词】：肺动脉高压 野百合碱 自噬 LC3
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R544.1
【目录】：

• 中英文缩词表3-5
• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-7
• 前言7-10
• 材料和方法10-15
• 1 动物10
• 2 实验器材10-11
• 3 药品试剂11-12
• 4 试剂配制12-15
• 实验方法15-23
• 5 模型的建立与评估血流动力学检测15-21
• 6 统计学处理21-23
• 结果23-38
• 1 MCT 诱导的肺动脉高压模型的的建立和评估23-25
• 2 HE 染色形态学检测肺动脉形态变化25-26
• 3 实时定量 PCR26-30
• 4.免疫组化方法检测肺动脉组织 LC3 和 p62 蛋白的表达30-36
• 5.Western blot 方法检测 p62、LC3 在肺动脉组织的表达36-38
• 讨论38-41
• 参考文献41-46
• 综述46-56
• 参考文献53-56
• 致谢56

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本文编号：1004992