STVNa对Iso诱导的成年大鼠心肌细胞肥大的保护作用及机制研究

发布时间：2017-10-11 04:34

  本文关键词：STVNa对Iso诱导的成年大鼠心肌细胞肥大的保护作用及机制研究

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【摘要】：心肌肥大是心脏在激素、细胞因子和外界压力等因素刺激下的一种代偿性反应。然而,持续的心肌肥大会造成心脏的失代偿并进一步发展为心衰。因此,探索心肌肥大发病机理,寻求预防及治疗心肌肥大的药物,是心血管研究领域的重要课题。异甜菊醇是从天然植物中提取的化学单体,异甜菊醇钠(Isoteviol sodium,STVNa)是其钠盐,提高了其溶解性。研究表明,异甜菊醇具有抗心肌缺血、抗心律失常和增强心肌收缩力等作用,但异甜菊醇对心肌肥大是否具有保护作用国内外尚无研究。本文采用异丙肾上腺素(Isoprenaline,Iso)诱导的成年大鼠心肌细胞肥大模型,研究STVNa是否对心肌细胞肥大具有保护作用并对其机制进行初步探讨:1、对现有的成年大鼠心肌细胞分离方法进行改良,得到产率高、活性好的心肌细胞。通过5μM Iso诱导,造成心肌细胞肥大。与正常对照组相比,Iso诱导的肥大心肌细胞表面积显著增加,从1.00增加到1.39±0.02(相对值,P0.05);反映心肌肥大的标记物脑房肽(BNP)表达显著增加,表达量从1.00±0.18增加到2.35±0.18(相对值,P0.05)。STVNa能够有效抑制Iso诱导的心肌肥大细胞表面积的增加。与Iso诱导肥大组相比,5μM、10μM、20μM STVNa处理后,Iso+STVNa组心肌细胞表面积显著减小,从1.39±0.02分别减小到1.17±0.01,1.14±0.01,1.13±0.01,(相对值,P值均小于0.05)。2、STVNa抑制心肌细胞肥大的机制:(1)本研究表明,STVNa可减少肥大心肌细胞内过量的活性氧自由基(ROS),稳定线粒体膜电位。与正常对照组相比,Iso诱导的肥大心肌细胞ROS显著增加,从1.00±0.06增加到2.03±0.11(相对值,P0.01);线粒体膜电位显著降低,从2.47±0.18减少到1.51±0.04(相对值,P0.05)。与Iso诱导肥大组相比,Iso+STVNa组心肌细胞内ROS显著减少,从2.03±0.11减少到1.32±0.07(相对值,P0.05);线粒体膜电位显著恢复,从1.51±0.04升高至1.85±0.09(相对值,P0.05)。(2)本研究还表明,STVNa可抑制肥大心肌细胞钙超载,提高钙离子回收速率,改善其收缩性能。与正常对照组相比,Iso诱导的肥大心肌细胞胞内钙离子浓度显著增加,钙离子回收时间显著延长,收缩性能显著降低;与Iso诱导肥大组相比,Iso+STVNa组心肌细胞钙超载显著抑制,钙离子回收时间显著缩短,收缩性能显著改善。结论:STVNa对Iso诱导的成年大鼠心肌细胞肥大具有保护作用,同时改善其收缩性能,其机制与减少细胞内过量ROS、抑制细胞内钙超载和提高钙离子回收速率有关。
【关键词】：STVNa 异丙肾上腺素 心肌肥大 ROS 心肌收缩性能
【学位授予单位】：华南理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R542.2
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 缩略词表12-14
• 第一章 绪论14-25
• 1.1 心肌肥大概述14-20
• 1.1.1 心肌肥大的分类及病理特征14-15
• 1.1.2 心肌肥大主要机理及研究现状15-20
• 1.2 心肌肥大的临床诊断和药物治疗现状20-23
• 1.2.1 心肌肥大的临床诊断20-21
• 1.2.2 心肌肥大失代偿及心衰的药物治疗21-23
• 1.3 STVNa简介23
• 1.4 研究背景、意义和内容23-25
• 1.4.1 研究背景23
• 1.4.2 研究意义23-24
• 1.4.3 研究内容24-25
• 第二章 STVNa对异丙肾上腺素诱导的成年大鼠心肌细胞肥大的影响25-42
• 2.1 引言25-26
• 2.1.1 成年大鼠心肌细胞分离25
• 2.1.2 心肌肥大模型的选择及评价25-26
• 2.2 实验仪器与试剂26-28
• 2.2.1 实验仪器26-27
• 2.2.2 实验试剂27-28
• 2.3 实验方法28-34
• 2.3.1 成年大鼠心肌细胞的分离及活性测定28-29
• 2.3.2 心肌细胞表面积测定及BNP mRNA表达检测29-33
• 2.3.3 统计分析33-34
• 2.4 结果与讨论34-41
• 2.4.1 成年大鼠心肌细胞分离的产率及活性34-36
• 2.4.2 STVNa对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的药效作用36-40
• 2.4.3 讨论40-41
• 2.5 本章小结41-42
• 第三章 STVNa抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大作用机制探讨42-67
• 3.1 引言42-45
• 3.1.1 心肌肥大与活性氧自由基42
• 3.1.2 心肌肥大与线粒体膜电位42-43
• 3.1.3 心肌肥大与钙稳态43-45
• 3.2 实验仪器与试剂45-46
• 3.2.1 实验仪器45-46
• 3.2.2 实验试剂46
• 3.3 实验方法46-51
• 3.3.1 激光共聚焦显微镜简介46-47
• 3.3.2 心肌细胞活性氧自由基检测47-48
• 3.3.3 心肌细胞线粒体膜电位检测48-49
• 3.3.4 心肌细胞胞内钙含量检测49-50
• 3.3.5 心肌细胞收缩性能和钙瞬变检测50-51
• 3.3.6 统计分析51
• 3.4 结果与讨论51-65
• 3.4.1 STVNa对异丙肾上腺素诱导的肥大心肌细胞活性氧自由基的影响51-52
• 3.4.2 STVNa对异丙肾上腺素诱导的肥大心肌细胞线粒体膜电位的影响52-54
• 3.4.3 STVNa对异丙肾上腺素诱导的肥大心肌细胞胞内钙含量的影响54-56
• 3.4.4 STVNa对异丙肾上腺素诱导的肥大心肌细胞收缩性能的影响56-58
• 3.4.5 STVNa对异丙肾上腺素诱导的肥大心肌细胞钙瞬变的影响58-62
• 3.4.6 讨论62-65
• 3.5 本章小结65
• 3.6 STVNa抑制心肌细胞肥大作用机理总结65-67
• 结论与展望67-68
• 结论67
• 创新之处67
• 展望67-68
• 参考文献68-77
• 攻读硕士学位期间取得的研究成果77-78
• 致谢78-79
• 附件79

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 张恒,王培勇,刘健,严竣;BAPTA对去甲肾上腺素刺激的大鼠心肌细胞蛋白合成及c-fos和β-MHC表达的影响[J];第三军医大学学报;2005年15期

2 韦丽兰;莫书荣;;成年大鼠心肌细胞的急性分离方法[J];中国组织工程研究;2012年11期

3 邓华;张斌;林岫芳;;硝苯地平对自发性高血压大鼠左心室肥厚心肌细胞蛋白偶联受体激酶的表达及亚细胞分布的影响[J];中华临床医师杂志(电子版);2011年01期

4 赵yN镭;李丹露;;心肌肥厚模型建立方法的研究进展[J];中国药房;2014年05期

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本文编号：1010517