PTEN在心肌缺血预适应和后适应中的调控作用

发布时间：2017-11-15 20:06

  本文关键词：PTEN在心肌缺血预适应和后适应中的调控作用

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【摘要】：背景和目的第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)是人体新发现的一种抑癌基因,它与细胞的生长、分化、凋亡、信号传递等密切相关。以往对PTEN的研究大多侧重于肿瘤方面,近些年来有研究发现PTEN/Akt信号通路在心肌重构、心肌肥厚、心肌缺血再灌注损伤等方面亦发挥着重要的作用,有研究发现应用特异性药物抑制PTEN的活性可以缩小心肌梗死后的梗死面积,改善心功能。心肌缺血预适应和缺血后适应可以降低心肌缺血再灌注损伤,缩小心肌梗死面积,但其机制尚未完全阐明。心肌缺血预适应和后适应对心脏的保护作用是否与PTEN/Akt信号通路的调控有关,目前尚缺乏研究。本实验通过构建心肌缺血再灌注、缺血预适应及缺血后适应动物模型,观察PTEN及其下游信号分子的改变,研究PTEN/Akt信号通路在心肌缺血再灌注损伤中的作用,探索PTEN/Akt信号通路在缺血预适应和后适应中的心脏保护机制。方法选取体重在280-320g的雄性SD大鼠60只随机分成4组,每组15只：①假手术组(Sham组)：左冠状动脉前降支只穿线不结扎；②缺血再灌注组(IR组)：结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注180min；③缺血预适应组(IPre组)：结扎左冠状动脉前降支5 min、灌注5 min,反复3次后,结扎30min再灌注180min；④缺血后适应组(IPost组)：结扎左冠状动脉前降支30min后,灌注30s、结扎30s,反复3次,再灌注180min。全程记录心电图的变化。每组随机选取6只,在造模结束时做Evans Blue、TTC染色,用于测量心肌缺血及梗死面积。其余9只于造模前后抽取静脉血并于实验结束后留取缺血心肌组织,用酶标法检测血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,用HE染色法观察心肌形态学变化,用Western blot法及免疫组织化学染色法检测缺血心肌组织PTEN、p-Akt的蛋白表达水平,用实时荧光PCR法检测PTEN mRNA的表达水平。最后利用SPSS软件对实验数据进行统计分析。结果1.心电图变化：结扎左冠状动脉前降支血管后,心电图可见ST段向上抬高,再灌注后ST段逐渐回落。2.心肌缺血及梗死面积测定：Sham组无明显心肌缺血及梗死,其余三组心肌缺血面积相似(P0.05)；IR组梗死面积最大,IPre组和IPost组的梗死面积较IR组明显缩小(P0.05),但IPre组和IPost组无明显差异。3.血清CK、LDH活性：缺血前四组水平相似,心肌缺血再灌注后IR组、IPre组及IPost组CK、LDH含量明显较Sham组升高；但与IR组比较,IPre组及IPost组的升高量较少(P0.05),且IPre组及IPost组无差异。4.缺血心肌PTEN、p-Akt蛋白表达水平：Western blot法及免疫组化法检测结果相似。与IR组比较,IPre组及IPost组的PTEN表达量降低,p-Akt的表达水平升高(P0.05)。免疫组化法发现PTEN、p-Akt主要定位在胞浆,部分胞核有着色。5. PTEN mRNA的表达水平：IPre组和IPost组的PTEN mRNA表达弱于IR组(P0.05)。结论PTEN/Akt信号通路在心肌缺血再灌注损伤中发挥着重要作用；心肌缺血预适应和缺血后适应通过调节PTEN/Akt信号通路的表达在缺血再灌注损伤中发挥保护心肌的作用。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

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本文编号：1190988