氯吡格雷治疗后血小板高反应性的危险因素及可能机制的相关研究

发布时间：2018-02-21 21:48

  本文关键词： 氯吡格雷 治疗后血小板高反应性 危险因素 基因多态性 糖尿病　出处：《中国人民解放军医学院》2016年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：调查氯吡格雷治疗后血小板高反应性(High on Treatment Platelet Reactivity, HTPR)的发病率及危险因素,分析基因多态性特点及与HTPR的相关性；探讨糖尿病导致氯吡格雷HTPR的可能机制,为HTPR临床防治提供理论依据。方法：临床研究部分：顺序入选578例我院心内科行PCI治疗的冠心病合格患者,年龄为62.3±12.22岁。给予标准双联抗血小板治疗阿司匹林(300mg)及氯吡格雷(300mg) 24h以上,或口服阿司匹林(100mg/天)及氯吡格雷(75mg/天)3天以上。抽取血样检测血小板功能和提取基因组DNA采用MassArray法检测单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism, SNP),根据ADP诱导的血小板聚集抑制率ADP-IR%将患者分组：ADP-IR%30%为HTPR组,30%为非HTPR组。随访至少12个月,记录心血管终点事件。基础研究部分：50只雄性SD大鼠随机分为空白组(BLA)、糖尿病组(DM)、氯吡格雷组(BLA+CLO)和糖尿病+氯吡格雷组(DM+CLO)4组,普通饲料饲养8周,采用灌胃法给予氯吡格雷,糖尿病模型采用STZ一次性注射法建立。流式细胞术检测CD62P水平和胞质内钙离子浓度([Ca2+]), Elisa法检测同型半胱氨酸(Homocysteine, Hcy)、超敏C反应蛋白(High Sensitive C-Reactive Protein, hs-CRP)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)、丙二醛(Malonaldehyde, MDA)、血栓素A2 (Thromboxane A2, TXA2)、前列环素(Prostacyclin, PGI2)、及一氧化氮(Nitric Oxide, NO)等指标的水平,Realtime-PCR和Western-blot检测CYP450、P2Y12. PKC基因和蛋白的表达.结果：临床研究部分：①HTPR.总发生率为15.74%,女性显著高于男性(24.29%vs 13.01%,P0.01).②性别(女性)、糖尿病、Hcy和hs-CRP与HTPR发生正相关(OR=2.023,95%CI:1.146-3.571, P=0.015; OR=2.815,95%CI:1.737-4.561, p=0.000; OR=2.479,95%CI:1.092-5.629,P=0.030; OR=8.476,95%CI:1.588-45.240,P=0.012)。③基因多态性检测发现4个SNP阳性位点rs1057910、 rs2242480、rs2246709和rs776746。④rs1057910与HTPR发生率呈正相关(OR=2.90,95%CI:1.44-5.68.P=0.003), rs2246709及rs776746与HTPR发生率呈负相关(分别OR=0.69,95%CI:0.49-0.98, P=0.039; OR=0.66,95%CI:0.45-0.97, P=0.034);女性与rs1057910突变率正相关(OR=3.24,95%CI:1.46-7.18,P=0.004),与rs776746突变率负相关(OR=0.57,95%CI:0.35-0.93, P=0.025)。⑤单SNP位点多态性与共存SNP位点多态性比较,对HTPR发生率影响无显著差别(14.6%vs 14.8%,P0.05)。⑥HTPR组再发不良终点事件的比例显著高于非HTPR组,HTPR与再发心绞痛(OR=1.486,95%CI:1.104-1.999,P=0.009)、支架内再狭窄(OR=1.86,95%CI:1.079-3.207, P=0.026)有显著关联性；⑦替格瑞洛替代治疗者的ADP-IR%显著高于氯吡格雷治疗的HTPR患者,而终点事件的发生率则显著降低(均P0.01)。基础研究部分：①与BLA+CLO组相比, DM+CLO组ADP-IR%显著降低,CD62P水平和[Ca2+]显著升高。②DM组和DM+CLO组血糖、TC、MDA、炎症指标及Hcy水平明显高于其他两组,HDL-C、PGI2、SOD及NO水平则显著低于BLA两组(均P0.01)。③与BLA+CLO组相比较,DM+CLO组PKC和P2Y12蛋白表达水平显著升高,CYP450蛋白水平则显著降低。④ADP-IR%与SOD和TXA2水平、CD62P水平呈负相关,[Ca2+]与CD62P水平呈正相关。结论：1)HTPR发生率为15.74%,女性、糖尿病及高Hcy和hs-CRP水平是HTPR发生的危险因素；2) HTPR者中发现4个SNP阳性位点rs1057910、rs2242480、 rs2246709和rs776746；rs1057910多态性是HTPR发生的危险因素,rs2246709及rs776746多态性是其保护因素；女性是rs1057910多态性的危险因素、rs776746多态性的保护因素；3)相对于单基因多态性,多个基因多态性共存并不增加HTPR的发生率；4) HTPR与终点事件(再发心绞痛和支架内再狭窄)显著相关；5)替格瑞洛能明显增加HTPR者血小板聚集抑制率,减少心血管终点事件。6)糖尿病状态通过三种可能机制导致氯吡格雷HTPR：①炎症反应及氧化应激增加,内皮功能障碍,PKC、CD62P表达水平及胞质内[Ca2+]升高共同引起血小板功能亢进；②P2Y12受体表达上调,氯吡格雷不能完全抑制血小板激活；③CYP450酶系表达量减少,氯吡格雷代谢的活化产物减少,减弱氯吡格雷治疗效果。
[Abstract]:鐩�鐨勶細璋冩煡姘�鍚℃牸闆锋不鐤楀悗琛，

本文编号：1522944