清道夫受体CD36在CML抑制泡沫细胞迁徙中的作用

发布时间：2018-04-11 21:07

本文选题：羧甲基赖氨酸 + 清道夫受体　；参考：《中国动脉硬化杂志》2017年12期

【摘要】：目的探讨清道夫受体CD36在羧甲基赖氨酸(CML)抑制泡沫细胞迁徙中的作用。方法 (1)首先观察CML对RAW264.7巨噬细胞脂质蓄积和细胞迁移的影响,继之观察泡沫细胞中CML与CD36的相互作用,实验分为:对照组、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)组(40 mg/L ox-LDL)、CML组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML);(2)观察CD36在CML抑制泡沫细胞迁移中的作用。实验分两部分:首先观察CD36抑制剂SSO对RAW264.7泡沫细胞迁移的影响,分对照组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML)和SSO组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+25μmol/L SSO);其次观察不同受体阻断对CML抑制泡沫细胞迁移的影响,分对照组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML),anti-CD36组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+2μmol/L anti-CD36),anti-RAGE组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+2μmol/L anti-RAGE),mal BSA组(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+400 nmol/L mal BSA)。连续24 h 1%BSA的培养基培养干预后进行相关检测(油红O染色、Transwell细胞迁移实验、免疫共沉淀实验、CD36免疫荧光染色等)。结果胆固醇氧化酶法定量及油红O染色定性显示CML可以有效促进RAW264.7巨噬细胞脂滴的蓄积并形成动脉粥样硬化斑块的关键组分泡沫细胞。Transwell细胞迁移实验和定量分析结果显示:与对照组相比,ox-LDL组中迁移泡沫细胞数减少43.5%(P0.05);与ox-LDL组相比,CML使泡沫细胞迁移数目减少49.2%(0.287±0.031比0.565±0.061,P0.05),表明CML抑制RAW264.7源性泡沫细胞迁移。免疫共沉淀实验及免疫荧光染色结果显示泡沫细胞中CML-CD36存在显著的相互作用。进一步的,用SSO或中和性抗体anti-CD36阻断CD36和清道夫受体抑制剂mal BSA阻断所有清道夫受体情况下,迁移的细胞数均较对照组显著增加(P0.05)。统计学分析显示,anti-CD36组细胞迁移指数为mal BSA组的81.3%(2.35±0.39比2.89±0.41,P0.05)。结论清道夫受体CD36是CML抑制RAW264.7泡沫细胞迁移的关键受体。
[Abstract]:Methods 1) to observe the effect of CML on lipid accumulation and cell migration of RAW264.7 macrophages, and then to observe the interaction between CML and CD36 in foam cells. The experiment was divided into two groups: control group.After 24 h culture of 1%BSA medium, the correlation was detected (oil red O staining and immunoprecipitation assay, CD36 immunofluorescence staining and so on).Results cholesterol oxidase assay and oil red O staining showed that CML could effectively promote the accumulation of lipid droplets in RAW264.7 macrophages and form atherosclerotic plaques.The results of co-immunoprecipitation and immunofluorescence staining showed that there was a significant interaction of CML-CD36 in foam cells.Statistical analysis showed that the cell migration index of anti-CD36 group was 81.3 卤0.39 in mal BSA group vs 2.89 卤0.41 in mal BSA group (P 0.05).Conclusion the scavenger receptor CD36 is the key receptor of CML to inhibit the migration of RAW264.7 foam cells.
【作者单位】：江苏大学附属医院检验科;西安医学院一附院心内科;江苏大学附属医院病理科;江苏大学附属医院心内科;
【基金】：国家自然科学基金(81370408,81770450) 江苏省自然科学基金(BK20131246) 江苏省卫计委项目(Q201308,QNRC2016836) 镇江市社会发展项目(SH2015038,SH2015023) 江苏省研究生科研创新计划(KYCX17_1801)
【分类号】：R54

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