氨甲酰化促红细胞生成素治疗大鼠慢性心力衰竭的作用机制的研究

发布时间：2018-04-20 00:21

  本文选题：氨甲酰化促红细胞生成素 + 慢性心力衰竭　； 参考：《广州医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：【研究目的】观察氨甲酰化促红细胞生成素(carbamylated erythropoietin,CEPO)治疗大鼠慢性心力衰竭(chronicheart failure,CHF)的作用,探讨其潜在的作用机制,为将来临床治疗CHF提供理论依据。【材料与方法】30只成年雄性SD大鼠随机分成假手术(Sham)组(n=6)和手术(Operation)组(n=24)。其中,Sham组常规分离腹主动脉,未行缩窄术;而手术组通过分离腹主动脉后实行跨腹主动脉缩窄(transverse abdominal aortic banding,TAAC)手术来构建压力超负荷慢性心力衰竭模型。术后第8周末,将Operation组存活的大鼠(n=19)进行随机分组,分为空白药物对照(Control)组(n=6)、促红细胞生成(erythropoietin,EPO)治疗组(n=7)、CEPO治疗组(n=6);而Sham组存活的大鼠(n=6)作为阴性对照组。EPO组予经腹腔注射EPO(3 000 U/kg),CEPO组予经腹腔注射CEPO(50ug/kg),Sham组及Control组经腹腔注射等量的0.9%NaCl,所有组别均进行每周3次,连续4周的治疗。治疗结束,所有大鼠行心脏超声测定舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)、收缩末期室间隔厚度(IVSs)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)、舒张末期室间隔厚度(IVSd)、左室射血分数(LVEF)等指标评价心脏结构及功能变化。然后禁食禁水24 h后通过腹腔内注射过量的水合氯醛麻醉药物处死大鼠,取左室心肌组织行病理检查观察心肌组织病理变化;TUNEL法观察心肌组织计算凋亡指数及western blot测定心肌组织cleaved Caspase-3蛋白表达水平评价心肌细胞凋亡情况;测定血常规了解红细胞计数及血红蛋白的变化评价治疗药物对促骨髓造血的影响。【结果】1.干预治疗4周后探测心脏彩超,结果显示,与Sham组比较,Control组大鼠的室壁厚度(IVSs、LVPWs、IVSd、LVPWd)明显增加,而左室射血分数明显降低;与Control组比较,EPO及CEPO组室壁厚度明显降低,而LVEF有所升高。2.干预治疗结束,获取心肌组织行病理切片HE染色观察,结果显示:Sham组大鼠心肌细胞胞核蓝染,染色清晰、胞间排列整齐有序,胞膜完整。Control组心肌细胞体积大小不一、细胞间隙增宽、排列紊乱,部分可见间质纤维化增生、胞膜破裂,细胞核着色不均。而与Control组比较,经CEPO及EPO治疗组心肌组织异常的病理变化有所改善。3.干预治疗结束,获取心肌组织行TUNEL染色观察细胞凋亡结果显示:Sham组大鼠心肌组织中细胞胞核蓝染,染色清晰,分布平均,可见少量棕褐色深染胞核,为阳性表达的凋亡细胞。与Sham组比较,Control组凋亡细胞数量显著增多;与Control组比较,CEPO组及EPO组凋亡细胞数量显著减少。4.干预治疗结束,获取心肌组织行Western blot检测结果显示:与Sham组比较,Control组cleaved Caspase-3表达量明显增加;与Control组比较,CEPO组及EPO组cleaved Caspase-3表达量均明显减少。5.干预治疗结束,获取大鼠全血行血常规测定,结果显示:与Sham组、Control组比较,CEPO组红细胞计数及血红蛋白无明显变化,而EPO组明显升高。【结论】1.CEPO可改善慢性心力衰竭大鼠的心脏功能,与EPO相当,且无促骨髓造血的作用。2.CEPO改善慢性心力衰竭大鼠心功能的作用机制,可能与抑制心肌细胞凋亡相关。
[Abstract]:銆愮爺绌剁洰鐨勩，

本文编号：1775409