阻断AT1受体后自发性高血压大鼠肾脏AQP3和AQP4表达的变化
本文选题：AT1受体 + 自发性高血压大鼠 ； 参考：《遵义医学院》2017年硕士论文
【摘要】：目的:观察12周龄自发性高血压大鼠用缬沙坦灌胃后血压的变化及肾脏中水通道蛋白3、4表达的变化,探讨缬沙坦阻断AT1受体后对自发性高血压大鼠鼠肾脏水通道蛋白3、4表达的影响。为新型抗高血压药的研发提供可能的作用靶点。方法:将11周龄自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和Wistar Kyoto(WKY)大鼠各12只,随机分为4组,分别为:SHR缬沙坦灌胃组(SHR-V)、SHR生理盐水灌胃组(SHR-N)、WKY大鼠缬沙坦灌胃组(WKY-V)、WKY大鼠生理盐水灌胃组(WKY-N),每组各6只。适应性喂养1周后,固定时间段采用鼠尾动脉无创测量系统测量血压,每只大鼠测量三次,取平均值。对SHR-V组和WKY-V组大鼠分别进行缬沙坦10mg(kg/day)灌胃,同等体积的生理盐水对SHR-N组和WKY-N组大鼠进行灌胃,随着实验时间增至28周,期间根据每周大鼠体重变化情况调整灌胃药物剂量。灌胃28周后,分别取大鼠腹主动脉血测醛固酮值;取肾组织,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain,RT-PCR)方法测定其AQP3 m RNA、AQP4 m RNA的表达;用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)法检测AQP3、AQP4蛋白定位表达;免疫印迹法(Western blotting,WB)检测AQP3、AQP4蛋白定量表达,对上述指标的结果统计分析。结果:1、WKY-N组和WKY-V组大鼠血压值无明显差异(P0.05);与SHR-N组相比,SHR-V组血压控制较好,随着实验时间的延长未见血压升高,两组血压值比较有统计学意义(P0.05);SHR-N组的血压值随实验周数的增加呈明显升高趋势,灌胃28周时均高于其它对照组,差别具有统计学意义(P0.05)。2、血浆醛固酮值结果:SHR-V组醛固酮水平与WKY-N组、WKY-V组比较,醛固酮水平显著性增高(P0.05);SHR-N组醛固酮水平高于WKY-N组、WKY-V组(P0.05),差异具有统计学意义;SHR-V组醛固酮水平与SHR-N组比较,醛固酮升高水平增高(P0.05),差异具有统计学意义。3、免疫组织化学结果:与WKY-N组、WKY-V组、SHR-V组比较,AQP3在SHR-N组中表达量最少,差异有统计学意义(P0.05);AQP3在SHR-V组表达高于SHR-N组,差异有统计学意义(P0.05)。WKY-N和WKY-V组大鼠肾脏AQP4蛋白表达量较SHR-N组、SHR-V组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);AQP4在SHR-V组表达高于SHR-N组,差异有统计学意义(P0.05)。4、RT-PCR方法测定结果:SHR-V组大鼠肾脏中的AQP3 m RNA、AQP4 m RNA含量表达水平显著高于其他三组表达(P0.05),差异具有统计学意义;SHR-N组大鼠AQP3 m RNA、AQP4 m RNA含量表达水平明显高于WKY-N组、WKY-V组(P0.05),差异具有统计学意义。5、免疫印迹法结果:AQP3、AQP4蛋白在SHR-V组大鼠肾脏中的表达水平明显高于SHR-N组大鼠肾脏中AQP3蛋白表达(P0.05),差异具有统计学意义;AQP3、AQP4蛋白在WKY-N组大鼠肾脏中的表达与WKY-V组大鼠肾脏中的AQP3蛋白表达无明显差异(P0.05),差异不具有统计学意义;SHR-N组大鼠肾脏中AQP3、AQP4的蛋白表达低于WKY-N组、WKY-V组大鼠肾脏蛋白(P0.05),差异具有统计学意义。结论:1、阻断AT1受体对自发性高血压大鼠血压控制效果较好,同时可反馈性提升血浆中醛固酮水平,增加对机体体液平衡的调节,进而改善血压。2、阻断AT1受体可促使SHR大鼠肾脏AQP3、AQP4 m RNA和蛋白的表达增多,从而增加机体对水分调节降低血压。
[Abstract]:Objective: To observe the changes of blood pressure and the expression of water channel protein 3,4 in the kidney in 12 weeks old spontaneously hypertensive rats with valsartan, and to explore the effect of valsartan blocking the AT1 receptor on the expression of aquaporin 3,4 in the kidney of spontaneously hypertensive rats. 12 rats of 11 weeks old spontaneously hypertensive rats (spontaneously hypertensive rats, SHR) and Wistar Kyoto (WKY) rats were randomly divided into 4 groups, respectively: SHR valsartan gavage group (SHR-V), SHR physiological saline group (SHR-N), valsartan gavage group of WKY rats and 6 rats in each group. Adaptive feeding 1 After the week, the blood pressure was measured by the noninvasive measurement system of the rat tail artery in the fixed time period. The rats were measured three times, and the average value was measured by three times. The rats in group SHR-V and group WKY-V were treated with valsartan 10mg (kg/day). The same volume of saline was administered to the SHR-N group and the WKY-N group, with the experiment time increasing to 28 weeks, during the period of the rats, according to the weekly rats. After 28 weeks of gastric perfusion, the dose of aldosterone was measured in the abdominal aorta of rats, and the expression of AQP3 m RNA, AQP4 m RNA was measured by Real-time quantitative polymerase chain (RT-PCR), and immunohistochemistry (Immunohistochemistry,) IHC) was used to detect AQP3, AQP4 protein location and expression; Western blotting (WB) was used to detect AQP3, the quantitative expression of AQP4 protein, and the results were statistically analyzed. Results: 1, there was no significant difference in blood pressure between the WKY-N group and the WKY-V group (P0.05). Compared with the SHR-N group, the blood pressure control was better, and the blood pressure was not seen with the prolongation of the experiment time. The blood pressure value of the two groups was statistically significant (P0.05), and the blood pressure in the SHR-N group increased significantly with the increase of the number of weeks, and was higher than the other control groups at 28 weeks. The difference was statistically significant (P0.05).2, and the serum aldosterone level was compared with the WKY-N group and the WKY-V group, the levels of aldosterone increased significantly. The level of aldosterone in group SHR-N was higher than that in group WKY-N and group WKY-V (P0.05), and the difference was statistically significant. The levels of aldosterone in group SHR-V were higher than those in group SHR-N (P0.05), and the difference was statistically significant (P0.05), and the difference was statistically significant. The results of immunohistochemical staining were the least in WKY-N, WKY-V, and SHR-V groups. The difference was statistically significant (P0.05), and the expression of AQP3 in group SHR-V was higher than that in group SHR-N. The difference was statistically significant (P0.05) in.WKY-N and WKY-V groups, the expression of AQP4 protein in the kidneys of rats was higher than that in the SHR-N group, and the SHR-V group was significantly higher than that in the SHR-V group (P0.05). Results: the expression level of AQP3 m RNA, AQP4 m RNA content in the kidney of SHR-V rats was significantly higher than that of the other three groups (P0.05), and the difference was statistically significant. The expression level in the kidneys of group HR-V rats was significantly higher than that of AQP3 protein expression (P0.05) in the kidney of group SHR-N (P0.05). The expression of AQP3, AQP4 protein in the kidneys of group WKY-N was not significantly different from that in the kidneys of WKY-V group rats (P0.05), the difference was not statistically significant; SHR-N group rats kidney AQP 3, the protein expression of AQP4 is lower than that of group WKY-N, and the difference of kidney protein (P0.05) in group WKY-V is statistically significant. Conclusion: 1, blocking the AT1 receptor is better for the control of blood pressure in spontaneously hypertensive rats. At the same time, it can improve the level of aldosterone in the plasma, increase the regulation of body fluid balance, and then improve the blood pressure.2 and block the AT1 receptor. The expression of AQP3, AQP4 m RNA and protein in the kidneys of SHR rats increased, thereby increasing the body's regulation of water and lowering blood pressure.
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R544.1
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，本文编号：1860356
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