微小RNA-27b在芪苈强心逆转心肌细胞肥大中的作用

发布时间：2018-05-31 17:16

  本文选题：病理性心肌肥大 + 血管紧张素Ⅱ　； 参考：《南京医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：背景:病理性心肌细胞肥大是导致心力衰竭的主要因素之一。芪苈强心胶囊是由11种成分组成的中药组方,在对心力衰竭的治疗上有明显的临床疗效。然而芪苈强心对心肌细胞肥厚的治疗作用机制并不明确。前期研究发现,芪苈强心通过PPAR-γ信号通路提高心梗后小鼠的心功能,抑制心力衰竭的进展。而miR-27b曾被报道在体内以及体外通过PPAR-y信号通路调控心肌细胞的病理性肥大。本实验旨在明确芪苈强心能否在体外试验中对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大经典模型起治疗作用,以及研究miR-27b在芪苈强心治疗中所起的作用。方法:通过分离出原代心肌细胞培养,随后以血管紧张素Ⅱ(10-6 mol/L,48小时)建立心肌细胞肥大模型,通过实时荧光定量PCR检测胚胎基因心钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、重组肌球蛋白7(Myh7)的表达,免疫荧光双染a-actin蛋白以及dapi染细胞核比较心肌细胞表面积大小,检测蛋白/DNA比值这三项指标检测心肌肥大。随后加入芪苈强心(0.5 ug/ml,48小时)观察空白和对照组的三项指标的变化,明确芪苈强心对心肌细胞肥大的作用。最后通过加入mmiR-27b的模拟物以及抑制剂,比较各组间的变化,明确miR-27b在芪苈强心抑制心肌细胞肥大中所起的作用。采集的数据以平均值±标准差表示,两组之间的比较采用t检验,多组间的比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用Tukey检验。所有数据均通过GraphPad软件进行录入和分析,双侧P0.05为有统计学意义。结果:我们的结果表明,血管紧张素Ⅱ的刺激能够使心肌细胞ANP,BNP,Myh7基因的表达量增高,细胞表面积增大,蛋白合成增加,而用芪苈强心刺激过细胞以后,ANP,BNP,Myh7的表达量则有明显下降,细胞表面积减小,蛋白合成减少,但是芪苈强心并不能降低基础水平ANP,BNP,Myh7的表达,减少细胞表面积和抑制蛋白合成。而miR-27b的表达量在心肌细胞肥大模型中升高,在加入了芪苈强心以后则明显降低。在此基础上再加入miR-27b的模拟物,能够使降低的ANP,BNP,Myh7基因的表达量再次升高,表面积增大,蛋白合成增加;而在模型中加入miR-27b的抑制剂后,并不能进一步改善心肌细胞肥大。结论:在细胞水平,芪苈强心能够缓解血管紧张素Ⅱ导致的心肌细胞的肥大,并且抑制miR-27b的表达。在此基础上提高miR-27b的表达能够导致心肌肥大再发生,而抑制miR-27b则不能进一步恶化心肌肥大的进程。因此,miR-27b在芪苈强心抑制病理性心肌细胞肥大的过程中,起着至关重要的作用。
[Abstract]:Background: pathological cardiomyocyte hypertrophy is one of the main factors leading to heart failure. Qiliqiangxin capsule is a traditional Chinese medicine prescription composed of 11 components, which has obvious clinical effect in the treatment of heart failure. However, the therapeutic mechanism of Qiliqiangxin on cardiomyocyte hypertrophy is unclear. It was found that Qiliqiangxin could improve the cardiac function and inhibit the progression of heart failure through PPAR- 纬 signaling pathway. MiR-27b has been reported to regulate the pathological hypertrophy of cardiomyocytes in vivo and in vitro through PPAR-y signaling pathway. The purpose of this study was to determine whether Qiliqiangxin could play a therapeutic role in angiotensin 鈪，

本文编号：1960656