脂联素通过调节巨噬细胞自噬水平发挥抗动脉粥样硬化的作用及机制
本文选题：AS + APN ； 参考：《首都医科大学》2017年硕士论文
【摘要】：背景及目的:脂联素(adiponectin,APN)已被证实具有保护血管内皮细胞、抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)、调节胰岛素抵抗等作用,本研究拟在细胞水平通过探究APN对巨噬细胞自噬水平的影响揭示其抗AS的新机制,为AS的临床治疗提供新靶点。方法:采用在体外培养人THP-1细胞系诱导的巨噬细胞,分为对照组,氧化低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)组及ox-LDL+APN组,给予细胞ox-LDL处理模拟斑块内环境后,采用Cell Counting Kit(CCK-8)方法检测ox-LDL对细胞的毒性,并使用蛋白质印迹方法(Western blot,WB)检测细胞内自噬相关蛋白表达情况。在给予细胞APN,ox-LDL及自噬抑制剂3-MA处理后,使用WB方法检测细胞内自噬相关蛋白表达情况,应用透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)观察巨噬细胞内自噬小体的形成情况,使用流式细胞术Annexin V Propidium Iodide(Annexin V/PI)双染色法检测细胞凋亡发生情况。结果:CCK-8结果表明巨噬细胞存活率随ox-LDL浓度升高明显下降(P?0.05),WB结果示给予ox-LDL处理后,细胞内自噬标记物LC3 II的表达水平明显升高,呈浓度及时间依赖性,且在ox-LDL的浓度为30 mg/L和孵育时间为6 h时自噬水平最高(P?0.05)。ox-LDL+APN组的巨噬细胞中LC3 II表达水平较单独给予ox-LDL处理组明显降低,同时电镜结果也表明ox-LDL+APN组的巨噬细胞内自噬小体的形成较ox-LDL组有明显减少(P?0.05)。Annexin V/PI染色结果显示APN可抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞早期凋亡,且APN对凋亡的抑制作用不依赖于自噬。结论:ox-LDL可使巨噬细胞内自噬水平增加,APN可能通过降低巨噬细胞内自噬水平发挥细胞保护作用,为APN应用于临床抗AS的治疗奠定理论基础。
[Abstract]:Background and objective: adiponectin (APN) has been proved to have protective effects on vascular endothelial cells, antiatherosclerosis and regulation of insulin resistance. This study aims to explore the effects of APN on macrophage autophagy at the cellular level to reveal its new mechanism of anti-atherosclerosis and to provide a new target for the clinical treatment of as. Methods: macrophages induced by human THP-1 cell line in vitro were divided into three groups: control group, ox-LDL treated group and ox-LDL APN group. The cytotoxicity of ox-LDL to cells was detected by Cell Counting Kitt CCK-8, and the expression of autophagy related proteins was detected by Western blotWB. After treatment with APNNox-LDL and 3-MA, the expression of autophagy related proteins was detected by WB method, and the formation of autophagy bodies in macrophages was observed by transmission electron microscopy (TEM). Apoptosis was detected by flow cytometry (Annexin V) and Annexin V / Pi staining. Results the survival rate of macrophages decreased significantly with the increase of ox-LDL concentration. The results showed that the expression of autophagy LC3II was increased in a dose-dependent and time-dependent manner after treatment with ox-LDL. The LC3 II expression level in macrophages of ox-LDL concentration of 30 mg / L and incubation time of 6 h was significantly lower than that of ox-LDL treatment group, and that of ox-LDL APN group was significantly lower than that of ox-LDL treatment group, and that of ox-LDL APN group was significantly lower than that of ox-LDL treatment group, and that of ox-LDL APN group was lower than that of ox-LDL group. The results of electron microscope also showed that the formation of autophagy in macrophages in ox-LDL APN group was significantly lower than that in ox-LDL group. The results showed that APN could inhibit the early apoptosis of macrophages induced by ox-LDL, and the inhibitory effect of APN on apoptosis was independent of autophagy. Conclusion the level of autophagy in macrophages increased by% ox-LDL. APN may play a protective role by decreasing the level of autophagy in macrophages, which may lay a theoretical foundation for the application of APN in the treatment of anti-atherosclerosis.
【学位授予单位】：首都医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R543.5
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 郑振群;;关于巨噬细胞的几个问题[J];山西医药杂志;1974年12期
2 ;豚鼠巨噬细胞经P_(204)处理后的抗石英细胞毒作用[J];国外医学参考资料(卫生学分册);1976年04期
3 邓侠进;;巨噬细胞的抗癌作用[J];遵义医学院学报;1979年02期
4 陆天才;;疾病对肺巨噬细胞的影响[J];煤矿医学;1982年01期
5 郭瑞清;祝彼得;;一种分离巨噬细胞的简单方法[J];滨州医学院学报;1990年02期
6 谢志坚;巨噬细胞异质性[J];医学综述;2001年06期
7 饶艳;运动及神经内分泌对巨噬细胞功能的调节[J];体育与科学;2002年05期
8 朱金元;;吸烟对肺巨噬细胞的影响[J];浙江医学教育;2003年01期
9 张俊峰;过氧化物酶体增殖物激活受体与单核/巨噬细胞系[J];医学综述;2004年03期
10 韦锦学;顾军;;巨噬细胞的激活诱导死亡[J];生命科学;2006年02期
相关会议论文 前10条
1 史玉玲;王又明;丰美福;;巨噬细胞激活作用的研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
2 吴国明;周辉;;巨噬细胞和创伤纤维化[A];2009年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2009年
3 李奇;王海杰;;透明质酸对于淋巴结巨噬细胞运动的影响[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
4 刘革修;欧大明;刘军花;黄红林;廖端芳;;丙丁酚在体外能抑制巨噬细胞脂质氧化介导的低密度脂蛋白氧化并调节氧化巨噬细胞的分泌功能[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展（下册）[C];1999年
5 叶金善;杨丽霞;郭瑞威;;环氧化酶-2/前列腺素E_2在血管紧张素Ⅱ刺激巨噬细胞表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子中的作用[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年
6 秦帅;陈希;孔德明;;构建由绿色荧光标记巨噬细胞的转基因斑马鱼系[A];贵州省中西医结合内分泌代谢学术会论文汇编[C];2012年
7 武剑华;徐惠绵;;肿瘤相关巨噬细胞在胃癌中的相关研究[A];第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议论文汇编[C];2014年
8 何军;;血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体升高巨噬细胞内胆固醇水平[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
9 宋盛;周非凡;邢达;;PDT诱导的凋亡细胞对巨噬细胞NO合成的影响[A];第七届全国光生物学学术会议论文摘要集[C];2010年
10 张磊;朱建华;黄元伟;姚航平;;血管紧张素Ⅱ对巨噬细胞(THP-1重细胞)凝集素样氧化低密度脂蛋白受体表达的影响[A];浙江省免疫学会第五次学术研讨会论文汇编[C];2004年
相关重要报纸文章 前10条
1 通讯员 李静 记者 胡德荣;恶性肿瘤巨噬细胞未必皆“恶人”[N];健康报;2014年
2 兰克;以尝试用巨噬细胞治瘫痪[N];科技日报;2000年
3 薛佳;免疫系统——人体的“卫士”[N];保健时报;2009年
4 记者 胡德荣;铁泵蛋白“维稳”铁代谢作用首次阐明[N];健康报;2011年
5 侯嘉 何新乡;硒的神奇功能[N];中国食品质量报;2003年
6 唐颖 倪兵 陈代杰;巨噬细胞泡沫化抑制剂研究快步进行[N];中国医药报;2006年
7 刘元江;新发现解释肿瘤为何易成“漏网之鱼”[N];医药经济报;2007年
8 本报记者 侯嘉 通讯员 何新乡;今天你补硒了吗[N];医药经济报;2003年
9 左志刚;升血小板药使用注意[N];医药养生保健报;2007年
10 记者 许琦敏;“铁泵”蛋白帮助回收铁元素[N];文汇报;2011年
相关博士学位论文 前10条
1 周赤燕;巨噬细胞MsrA对动脉粥样硬化的干预研究[D];武汉大学;2013年
2 章桂忠;TIPE2蛋白调控细胞增殖和炎症的机制研究[D];山东大学;2015年
3 张瑜;DKK1抑制巨噬细胞内脂质沉积及其相关分子机制[D];山东大学;2015年
4 孟涛;异丙酚对心脏收缩功能的抑制作用及其对巨噬细胞分泌功能调节的机制研究[D];山东大学;2015年
5 周兴;基于酵母微囊构建新型口服巨噬细胞靶向递送系统的研究[D];第三军医大学;2015年
6 蒋兴伟;Tim-3对巨噬细胞极化的调控机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2015年
7 刘伯玉;清道夫受体A介导小鼠巨噬细胞吞噬钩端螺旋体研究[D];上海交通大学;2013年
8 杨绍俊;miRNA-155介导ESAT-6诱导巨噬细胞凋亡的分子机制及其在结核诊断中的作用[D];第三军医大学;2015年
9 翟光耀;单核/巨噬细胞Ly6C~(low)亚群在心肌梗死后瘢痕形成期的抗炎特性研究[D];北京协和医学院;2014年
10 韩露;TRB3介导的脂肪组织巨噬细胞极化与糖尿病冠状动脉病变关系的研究[D];山东大学;2015年
相关硕士学位论文 前10条
1 任新宇;脂联素通过调节巨噬细胞自噬水平发挥抗动脉粥样硬化的作用及机制[D];首都医科大学;2017年
2 李旭卉;自噬在巨噬细胞抗绵羊肺炎支原体感染中作用的研究[D];宁夏大学;2017年
3 马春梅;AP0E~(-/-)小鼠TLR9介导巨噬细胞极化效应对动脉粥样硬化作用的研究[D];福建医科大学;2015年
4 张译丹;盐皮质激素受体拮抗剂调控巨噬细胞表型对实验性矽肺的作用[D];河北医科大学;2015年
5 卢文冉;HCV core蛋白作用的巨噬细胞培养上清对肝细胞生物学性状的影响[D];河北医科大学;2015年
6 李文建;载脂蛋白E影响巨噬细胞因子表达及分型的机制研究[D];河北医科大学;2015年
7 曹爽;高糖对巨噬细胞TLR4信号转导的调节作用[D];河北医科大学;2015年
8 宁程程;肿瘤相关巨噬细胞在子宫内膜癌雌激素敏感性中的作用及机制研究[D];复旦大学;2014年
9 高龙;PLD4在肿瘤相关巨噬细胞抑制结肠癌增殖中的作用研究[D];成都医学院;2015年
10 任虹;感染期子宫颈癌U14细胞荷瘤小鼠抑制巨噬细胞CCL5分泌的机制研究[D];河北医科大学;2015年
，本文编号：2030381
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xxg/2030381.html
