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下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响

发布时间:2018-07-15 07:16
【摘要】:目的探讨下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响。方法选取37例下肢动脉粥样硬化闭塞症(AS)患者外周血为AS组。另外选取同期37名健康体检者外周血为对照组。新鲜血管组织取自1例下肢AS患者截肢远端血管为实验组,以其截肢近端血管为对照。实时荧光定量PCR检测新鲜血管组织,分离得到的外周血中单核细胞和微泡中miRNA-199a-3p表达水平。以人单核细胞TTHP-1为载体,miRNA-199a-3p mimics组和miRNA-199a-3p inhibitor组分别转染miRNA-199a-3p mimics和miRNA-199a-3p inhibitor,同时设置空白对照组。实时荧光定量PCR检测各组miRNA-199a-3p、趋化因子单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、调解活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)和Fractalkine表达水平。结果下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p表达水平显著高于正常组织(P0.05)。AS组外周血单核细胞和微泡中miRNA-199a-3p表达水平均显著高于对照组(P0.05)。与空白对照组相比,miRNA-199a-3p mimics组miRNA-199a-3p表达水平显著上升(P0.05),miRNA-199a-3p inhibitor组miRNA-199a-3p表达水平显著下降(P0.05)。与空白对照组相比,miRNA-199a-3p mimics组MCP-1、RANTES和Fractalkine的mRNA表达水平显著降低(P0.05),miRNA-199a-3p inhibitor组MCP-1、RANTES和Fractalkine的mRNA表达水平显著上升(P0.05)。结论动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞高表达miRNA-199a-3p,并以微泡形式分泌到外周血中,抑制单核细胞中MCP-1、RANTES和Fractalkine等趋化因子的表达,是一种动脉粥样硬化保护因素。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miRNA-199a-3p in atherosclerotic plaque of lower extremity on peripheral blood monocytes. Methods the peripheral blood of 37 patients with lower extremity atherosclerosis obliterans (as) were selected as group. In addition, the peripheral blood of 37 healthy persons in the same period was chosen as the control group. Fresh vascular tissue was obtained from a patient with as in the experimental group, and the proximal vessel was used as the control group. The expression of miRNA-199a-3p in peripheral blood monocytes and microbubbles was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Human monocyte TTHP-1 was transfected with miRNA-199a-3p mimics and miRNA-199a-3p inhibitor, respectively. The expression of miRNA-199a-3p, monocyte chemotactic protein (MCP) -1, RANTES and Fractalkine were detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Results the expression level of miRNA-199a-3p in atherosclerotic plaque of lower extremity was significantly higher than that in normal tissue (P0.05). The expression of miRNA-199a-3p in peripheral blood monocytes and microbubbles in as group was significantly higher than that in control group (P0.05). The expression level of miRNA-199a-3p in miRNA-199a-3p mimics group was significantly higher than that in blank control group (P0.05). The miRNA-199a-3p expression level in miRNA-199a-3p inhibitor group was significantly lower than that in control group (P0.05). Compared with the control group, the mRNA expression levels of MCP-1RANTES and Fractalkine in the mimics group were significantly lower than those in the control group (P0.05). The mRNA expression levels of MCP-1RANTES and Fractalkine in the MCP-1RANTES and Fractalkine inhibitor group were significantly increased (P0.05). Conclusion macrophages in atherosclerotic plaques express miRNA-199a-3phighly and secrete into peripheral blood in the form of microbubbles to inhibit the expression of chemokines such as MCP-1RANTES and Fractalkine in monocytes, which is a protective factor for atherosclerosis.
【作者单位】: 云南省第一人民医院昆明理工大学附属医院普外一科;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(81260066) 云南科技计划项目(2013FB199)
【分类号】:R543.5

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